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黄华尔1991

铜虫 (初入文坛)

[交流] 有关血清使用中的常见问题解答(摘自hyclone中国网站) 已有2人参与

1.保存血清最好的办法?

我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

2.如何解冻血清才不会使产品质量受损?

我们建议您将血清从冷冻箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

3.血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?

血清中沉淀物的出现有许多原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性造成的;而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。

若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管中,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。

4.何谓热灭活?有必要做热灭活吗?

一般以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活性,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。

实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经过处理的血清对细胞生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。

而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。

因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热灭活这一步。如此以来,不但节省您宝贵的时间,更确保您血清的质量!

5.如何避免沉淀物的出现?

我们建议您在使用血清的时候,注意正确的血清解冻步骤,并尽量避免灭活血清及长时间的将血清置于高温环境中。
(摘自hyclone中国网站)
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3楼2016-08-31 08:31:33
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15zqsun

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主你好,我做甲壳动物血淋巴细胞,取完血后加入抗凝剂EDTA并加3%甲醛固定后,放四度冰箱里第二天都出现了絮状沉淀也是脂蛋白变性引起的吗

发自小木虫Android客户端
2楼2016-08-30 21:36:42
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