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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » HPLC单糖组成分析问题~！！求助求助~~！！
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Super少

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC单糖组成分析问题~！！求助求助~~！！ 已有3人参与

最近在用HPLC做单糖组成，仪器是waters的，可是发现，无论是上样标准单糖，还是上样我的水解后的样品，都是在3分20秒出一个峰，之后就没有任何东西了。想请教大家，是不是我的水解方法有问题？我用TFA水解，之后需不需要再加硼氢化钠还原呢？？？我昨天用了一个标准品半乳糖，直接溶解后，上样，就在3分20秒和6分多，出来了两个峰。这是为什么？？
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1楼 2015-04-19 10:48:58
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望陈莫及1984

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Super少(答非所问代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注 2015-04-22 10:50:52
用的是什么检测器？是不是你的检测器用错了？应该用示差检测器，而非紫外检测器。
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命中注定的自作自受
2楼2015-04-19 19:41:53
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futingwyang

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Super少(答非所问代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注 2015-04-22 10:51:01
看看你的流动相比例。我做的糖类用的是乙腈和水作为流动相。如果觉得用标品摸索条件浪费的话，建议改用葡萄糖。又便宜纯度又高
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3楼2015-04-20 13:06:57
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Super少

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 望陈莫及1984 at 2015-04-19 19:41:53
用的是什么检测器？是不是你的检测器用错了？应该用示差检测器，而非紫外检测器。

我用的就是示差检测器。谢谢回帖，标准品的问题已经解决了，现在就是我的样品，TFA水解后，只在3min出一个乙腈峰，后面就没有了。这个不知道是不是TFA水解之后，需不需要硼氢化钠还原？
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4楼2015-04-20 20:45:17
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Super少

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by futingwyang at 2015-04-20 13:06:57
看看你的流动相比例。我做的糖类用的是乙腈和水作为流动相。如果觉得用标品摸索条件浪费的话，建议改用葡萄糖。又便宜纯度又高

谢谢~！我的流动相也是乙腈和水。就是现在想搞清楚，TFA水解样品后，需不需要硼氢化钠还原？请问有没有文献报道过，硼氢化钠还原的？
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5楼2015-04-20 20:46:41
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YR-王

铜虫 (小有名气)
液相色谱柱就是C18柱？流动相我之前用5%甲醇水,样品水溶，几乎都是跟溶剂峰一起出来啦？难道乙腈水就可以分开？

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6楼2016-11-04 08:32:28
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

我们是TFA水解后加甲醇蒸干去掉多余的TFA，没有加硼氢化钠还原的说法。
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7楼2016-11-04 10:00:07
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