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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » EMSA蛋白浓度梯度升高，探针带有减弱，却看不到蛋白带，求助大家！
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单脚酒杯

新虫 (初入文坛)

[求助] EMSA蛋白浓度梯度升高，探针带有减弱，却看不到蛋白带，求助大家！ 已有3人参与

求教各位，我用的试剂盒是Roche的DIG Gel Shift 2nd Generation. 这个探针和这个蛋白是肯定结合了的，我之前做出来过，这次只是想做一个梯度进一步验证一下，实验条件（包括蛋白浓度的大概范围，胶浓度，电泳条件等）和以前也没什么区别，但却看不出蛋白带了（如图片1所示，泳道1只有探针，泳道2-7是探针+依次加量的蛋白，泳道8是探针+蛋白+过量竞争探针），之后又做了一次，提高了探针浓度，结果更糟糕（如图片2所示，泳道1只有探针，泳道2-7是探针+依次加量的蛋白，探针+蛋白+过量竞争探针的对照组没有截入图中）。请有经验的同学帮帮我，看看蛋白结合带跑成这样到底是什么原因，不胜感谢！

EMSA蛋白浓度梯度升高，探针带有减弱，却看不到蛋白带，求助大家！
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EMSA蛋白浓度梯度升高，探针带有减弱，却看不到蛋白带，求助大家！-1
图片2.png
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1楼 2015-04-13 20:22:22
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单脚酒杯

新虫 (初入文坛)
顶一下，请大家说帮帮忙啊！！！
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2楼2015-04-14 09:39:45
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单脚酒杯

新虫 (初入文坛)
请大家帮帮忙，谢谢！
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3楼2015-04-14 17:21:20
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fificici

新虫 (初入文坛)
我也遇到过这种情况 楼主解决了没？
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4楼2015-04-14 17:57:20
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单脚酒杯

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fificici at 2015-04-14 17:57:20
我也遇到过这种情况 楼主解决了没？

没有啊，希望有人能知道吧
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5楼2015-04-14 18:41:12
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单脚酒杯

新虫 (初入文坛)
顶一下，希望大家能看到~
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6楼2015-04-16 10:00:03
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新虫 (初入文坛)
有人知道吗？
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7楼2015-04-18 15:39:34
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新虫 (初入文坛)
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8楼2015-04-21 14:48:52
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新虫 (初入文坛)
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9楼2015-04-23 14:15:13
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10楼2015-04-25 10:47:27
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