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单脚酒杯

新虫 (初入文坛)

[求助] EMSA蛋白浓度梯度升高,探针带有减弱,却看不到蛋白带,求助大家! 已有3人参与

求教各位,我用的试剂盒是Roche的DIG Gel Shift 2nd Generation. 这个探针和这个蛋白是肯定结合了的,我之前做出来过,这次只是想做一个梯度进一步验证一下,实验条件(包括蛋白浓度的大概范围,胶浓度,电泳条件等)和以前也没什么区别,但却看不出蛋白带了(如图片1所示,泳道1只有探针,泳道2-7是探针+依次加量的蛋白,泳道8是探针+蛋白+过量竞争探针),之后又做了一次,提高了探针浓度,结果更糟糕(如图片2所示,泳道1只有探针,泳道2-7是探针+依次加量的蛋白,探针+蛋白+过量竞争探针的对照组没有截入图中)。请有经验的同学帮帮我,看看蛋白结合带跑成这样到底是什么原因,不胜感谢!

EMSA蛋白浓度梯度升高,探针带有减弱,却看不到蛋白带,求助大家!
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EMSA蛋白浓度梯度升高,探针带有减弱,却看不到蛋白带,求助大家!-1
图片2.png
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单脚酒杯

新虫 (初入文坛)

顶一下,希望大家能看到~
6楼2015-04-16 10:00:03
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单脚酒杯

新虫 (初入文坛)

顶一下,请大家说帮帮忙啊!!!
2楼2015-04-14 09:39:45
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单脚酒杯

新虫 (初入文坛)

请大家帮帮忙,谢谢!
3楼2015-04-14 17:21:20
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fificici

新虫 (初入文坛)

我也遇到过这种情况 楼主解决了没?
4楼2015-04-14 17:57:20
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