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xiaozaoyu

新虫 (小有名气)

[求助] 请教关于脂质体浓缩的方法 已有4人参与

现在实验进行到家兔的药物动力学研究,因为包封的模型药水溶性特别差,导致脂质体载药量少,给到家兔体内后测不到药物的浓度。制备工艺又采用的是凝胶柱洗脱,在过柱的时候脂质体会被洗脱液稀释一倍多,本来载药量不高又被稀释,药物浓度就更低了,按照这样的低浓度给家兔注射最大安全的体积10ml,理论上给药量也是很低的。现在就求助一下,怎么浓缩脂质体,或者对于这类溶解性差的药物怎么提高脂质体的载药量。

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脂质体

至尊木虫 (知名作家)

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感谢参与,应助指数 +1
可以考虑超高速离心,将脂质体离心下来,倾去上清液,然后自己定容,重新分散脂质体。就是不知道你的脂质体刚性如何,能否承受高速离心?
2楼2015-04-08 07:48:52
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tianweiyq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先浓缩的方法:可以尝试采用楼上的方法,还可以使用超滤离心管(30K-300K都可以)进行浓缩,但超滤离心管要大一点的,可以上样2-5ml。如果量足够多可以采用超滤膜包,甚至采用透析袋都可以实现脂质体的浓缩。
关于制备,可以提高药物与磷脂的比例或者同时提高脂相的浓度。
忘记背后的,努力面前的!
3楼2015-04-08 08:10:00
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belladonae

金虫 (著名写手)

少将

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1. 水溶性差的药物在脂质体中包封率应该比较高。载药量不会少。
2. 超滤浓缩,低速长时间离心。
4楼2015-04-08 10:09:16
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普通回帖

xiaozaoyu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by belladonae at 2015-04-08 10:09:16
1. 水溶性差的药物在脂质体中包封率应该比较高。载药量不会少。
2. 超滤浓缩,低速长时间离心。

谢谢,我用紫外测包封率很高,但是用高效液相测的结果不到一半,最终注射到动物体内,药量就非常低,基本测不到的样子。

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5楼2015-04-08 14:46:49
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xiaozaoyu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 脂质体 at 2015-04-08 07:48:52
可以考虑超高速离心,将脂质体离心下来,倾去上清液,然后自己定容,重新分散脂质体。就是不知道你的脂质体刚性如何,能否承受高速离心?

我用乙醇做的有机溶剂来溶解国产的大豆磷脂和胆固醇,用注入法制备,隔夜就会有沉淀的,之前有试过离心分离没包封的药物,当时用紫外没测出包封率。没有太去深究什么原因。如此说来我也可以去试试

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6楼2015-04-08 14:50:38
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xiaozaoyu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tianweiyq at 2015-04-08 08:10:00
首先浓缩的方法:可以尝试采用楼上的方法,还可以使用超滤离心管(30K-300K都可以)进行浓缩,但超滤离心管要大一点的,可以上样2-5ml。如果量足够多可以采用超滤膜包,甚至采用透析袋都可以实现脂质体的浓缩。
关 ...

谢谢,学习了。超滤离心的话是按照浓缩蛋白的步骤,用透析袋的话又是怎么操作呢。

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7楼2015-04-08 14:53:27
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belladonae

金虫 (著名写手)

少将

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaozaoyu at 2015-04-08 07:46:49
谢谢,我用紫外测包封率很高,但是用高效液相测的结果不到一半,最终注射到动物体内,药量就非常低,基本测不到的样子。
...

做方法了吗?脂质体的功能之一就是包封水溶性差的药物。如果你参考了文献的剂量,不会测不到的,是静注还是什么?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2015-04-08 16:21:01
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xiaozaoyu

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by belladonae at 2015-04-08 16:21:01
做方法了吗?脂质体的功能之一就是包封水溶性差的药物。如果你参考了文献的剂量,不会测不到的,是静注还是什么?...

包封率没有做过方法学,总之就是紫外测的结果和高效液相的差别很大。最终就是注射给家兔的。测了几次血药峰面积都特别小。很像杂质峰的感觉,但是药量稍大一点,峰形就好些。

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9楼2015-04-08 16:41:40
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36696990

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
HPLC的准确些,是否考察包封率时用同一批次脂质体,测量时间不要间隔太长,鉴于稳定性较差,建议重新考察处方比例。
没有做不到~
10楼2015-04-08 16:52:21
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