| 查看: 2664 | 回复: 2 | ||
[求助]
巯基活性的测定：简化的巯基试剂（DTNB）法
|
|
巯基活性的测定：简化的巯基试剂（DTNB）法 巯基试剂的配置：称取DTNB 0.0594 g，盐酸胍 0.0172 g，EDTA 0.0112 g 用0.1 mol/L PBS试剂溶解定容至100 mL。 将样品配成100 uL溶液，加入20 uL 1.2 mol/L HCl和400 uL 0.1 mol/L EDTA反应10 min去除金属，加入200 uL巯基试剂，混匀3 min使MT变性后与DTNB形成黄色络合物，用0.1 mol/L PBS pH7.3稀释至6 mL，在412 nm处测紫外吸收值。用C=DA/ε（ε=1.23×104（mol/L）-1•cm-1）测算巯基浓度。 请问 公式C=DA/ε（ε=1.23×104（mol/L）-1•cm-1）中D代表什么 谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
07化学280分求调剂
已经有3人回复
-
考研化学308分求调剂
已经有8人回复
-
070300化学求调剂
已经有7人回复
-
生物学一志愿985，分数349求调剂
已经有9人回复
-
341求调剂(一志愿湖南大学070300)
已经有4人回复
-
336化工调剂
已经有5人回复
-
279分求调剂 一志愿211
已经有17人回复
-
291求调剂
已经有4人回复
-
328求调剂，英语六级551，有科研经历
已经有12人回复
-
一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白中巯基和二硫键的测定
已经有13人回复
- 蛋白质巯基的测定问题
已经有14人回复
- 关于用Ellman法测巯基，在计算中出现负值是怎么回事
已经有6人回复
- 半胱氨酸中巯基的保护
已经有6人回复
- 胺基和巯基修饰的硅片对纳米金的固定
已经有12人回复
- 巯基合成二硫键的文献（注：不包括含巯基产物自身反应）最好Scifinder或Reaxys上的。
已经有9人回复
- 跪求巯基化DOX的合成方法和经验
已经有6人回复
- 用ellman法测定面粉中的二硫键
已经有11人回复
- 面团中自由巯基含量测定
已经有12人回复
- 引入巯基的反应都有哪些？谢谢！
已经有4人回复
- 如何测定巯基含量
已经有11人回复
- 求助各位大神，巯基含量如何测定！急急急~~~~~~~~~
已经有10人回复
- 巯基乙酸修饰的量子点
已经有17人回复
- 巯基的滴定方法
已经有10人回复
- 巯基化后形成多多聚体
已经有7人回复
- 水溶性荧光探针除去巯基乙酸
已经有8人回复
- 巯基保护和脱保护问题
已经有13人回复
- 请教巯基和羟基在反应上的区别
已经有3人回复
- 2-巯基苯并噻唑脱巯基方法
已经有5人回复
- 急问巯基怎么检测？
已经有2人回复
- 【求助】巯基和巯基间可以发生反应吗？若可以，反应机理是什么？
已经有17人回复
- 【求助】巯基乙胺的巯基保护
已经有7人回复
- 【求助】谷胱甘肽含量的测定方法
已经有6人回复
zzlaile123
木虫 (正式写手)
- 应助: 26 (小学生)
- 金币: 4809.1
- 散金: 10
- 红花: 2
- 帖子: 567
- 在线: 61.6小时
- 虫号: 1709268
- 注册: 2012-03-22
- 性别: GG
- 专业: 半导体材料
2楼2015-05-10 23:32:19
1012203014
金虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 334.1
- 散金: 31
- 红花: 3
- 帖子: 395
- 在线: 232.6小时
- 虫号: 1349300
- 注册: 2011-07-18
- 性别: GG
- 专业: 化学反应工程
|
测定总巯基含量时，15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。测定自由巯基含量时，15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中，而后加入50 μL Ellman 试剂 （DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液，4 mg/mL），在25℃条件下保温反应60 min, 离心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 处测定吸光值，以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。 巯基含量的计算公式如下： SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C 式中：A —除去试剂空白后样品的吸光度值 D—稀释倍数 C—样品浓度（mg/mL） 问题1：上述公式中稀释倍数D是怎么算的（具体的式子），如果完全按照上述方法是不是就是1？ 问题2：我测的物质为毛发固体样品，二硫键含量在350μmol/g附近，此种测试方法是否具有可行性 问题3：由于毛发样品中含有非水溶性蛋白，又没哟测量二硫键含量的更好的方法 如解答必重谢 |
3楼2015-10-07 21:23:38
