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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 药材含量测定时两类成分含量差别很大，该如何解决？
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残-影

金虫 (小有名气)

[求助] 药材含量测定时两类成分含量差别很大，该如何解决？ 已有1人参与

如题，目前在用UPLC-Q/TOF 做一味中药的含量测定，其中有两个成分含量特别高，按照我的进样浓度可达250μg/ml，而另外一类黄酮类物质含量很低，只有0.02μg/ml的样子，所以做标曲时候就很纠结，我如果迁就含量高的稀释样品，那么含量低的就检测不到了，如果迁就含量低的，则含量高的物质无法包含在标曲内（最大进样浓度在300μg/ml的样子），有没有人遇到过同样的情况呢？

PS:     用TOF做定量确实不如TQ，我做样品时候发现重复性很差，同一样品同一个物质连续三针RSD可以达到18%有的更高，可是目前现有条件只能用TOF，有没有做过的高人，可以传授给我一些经验？
请各位高人赐教！

[ Last edited by archbishop on 2015-4-4 at 11:48 ]
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不才在下本姑娘这厢有礼了
1楼 2015-04-04 10:50:40
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old_yang

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
残-影: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢，那么方法学考察也是要做两套么？ 2015-04-05 21:54:20
只能分别定量了，处理两个样品，一个原始浓度，定量低浓度的；一个稀释100倍，测定浓度高的；分别计算。
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8楼2015-04-05 16:41:28
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
不同的物质标准曲线可以用不同的浓度范围，比如：
A: 2 ng/mL, 5 ng/mL, 10 ng/mL, 20 ng/mL, 50 ng/mL, 100 ng/mL,
B: 10 μg/mL, 25 μg/mL, 50 μg/mL, 100 μg/mL, 250 μg/mL, 500 μg/mL,
确定好一个储备液的浓度向下稀释就可以了。
TOF就是不准，因为它分辨率很高，分辨率和准确度是负相关的。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-04-04 11:52:56
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残-影

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-04 11:52:56
不同的物质标准曲线可以用不同的浓度范围，比如：
A: 2 ng/mL, 5 ng/mL, 10 ng/mL, 20 ng/mL, 50 ng/mL, 100 ng/mL,
B: 10 μg/mL, 25 μg/mL, 50 μg/mL, 100 μg/mL, 250 μg/mL, 500 μg/mL,
确定好一个储备 ...

我知道标曲浓度可以在不同范围，可是就像你说的B的浓度达到500μg/mlUPLC的柱子就会过载，MS也不能进那么高的浓度，怎么办呢？
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不才在下本姑娘这厢有礼了
3楼2015-04-04 14:20:43
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by 残-影 at 2015-04-04 14:20:43
我知道标曲浓度可以在不同范围，可是就像你说的B的浓度达到500μg/mlUPLC的柱子就会过载，MS也不能进那么高的浓度，怎么办呢？...

选用响应更低的离子或碎片离子。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
4楼2015-04-04 14:25:57
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