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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » marker 到底怎么了？求大神详解，感激不尽
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kuileiwawa

金虫 (小有名气)

[求助] marker 到底怎么了？求大神详解，感激不尽 已有6人参与

昨天跑的marker，有的用loadingbuffer稀释了，500bp的，2%的琼脂，第一张图是80V，30min，然后又放进去跑半小时了就是第二张图了，感觉这个图条带之间的距离太小了，还有是不是太亮了，哎，怎样才能跑出个好看的marker

marker 到底怎么了？求大神详解，感激不尽
1.jpg


marker 到底怎么了？求大神详解，感激不尽-1
2.jpg
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把小木虫发展壮大！！！
1楼 2015-03-29 10:47:14
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Jiajiajj

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-03-30 08:31:34
Maker 不用加loading buffer ,琼脂糖一般用0.8%～1%的，我一般都用1%，你试试
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3楼2015-03-29 12:01:45
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kuileiwawa(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-30 20:54:59
1%胶120V,20MIN.可以用DL2000,或DL10000。500bp的MARK虽好，但条带太多，不宜操作。楼主一下点掉50多UL的mark，
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采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2015-03-30 09:59:37
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781055707

木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by kuileiwawa at 2015-03-31 10:17:05
我这个marker的大小应该是用2%吧，我想用1%试下了，电泳槽有问题，，，只有一个哦，没法试
...

电泳槽用了几年了呀，4，5年的话就换吧，小号的电泳槽便宜的。我觉得你1%的也不会太好。还有你的MARK是500BP的还是DL500的呀。
marker 到底怎么了？求大神详解，感激不尽-2
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marker 到底怎么了？求大神详解，感激不尽-3
VG9M7{E`[OOG53BSHV35`_3.png
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采菊东篱下，悠然见南山。
14楼2015-03-31 11:09:10
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1993云崖

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用1.2～1.5得胶跑，先用150v把样品压进胶，再用130v跑，跑到胶的2/3处即可

[ 发自小木虫客户端 ]
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暮雪千山，厚积薄发
17楼2015-04-01 23:13:06
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普通回帖

Jiajiajj

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-03-30 08:31:31
Maker 不用加Loading buffer 的，我一般用的也是1%得琼脂糖，跑电泳的琼脂糖在0.8%～1%，你试试
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2楼2015-03-29 11:59:37
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
marker多大的，要用2%的胶？2%的胶适合分离的范围最大的才2000
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
5楼2015-03-30 13:56:26
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
美女，marker还没跑好啊？
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没有做不到，只有想不到！
6楼2015-03-30 15:25:23
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781055707

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-30 09:59:37
1%胶120V,20MIN.可以用DL2000,或DL10000。500bp的MARK虽好，但条带太多，不宜操作。楼主一下点掉50多UL的mark，

按理说2的胶应该能跑的很开了，可能是电泳槽线路太老了，正电荷不足。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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采菊东篱下，悠然见南山。
7楼2015-03-30 18:36:16
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kuileiwawa

金虫 (小有名气)
内容已删除
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把小木虫发展壮大！！！
8楼2015-03-31 10:05:54
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kuileiwawa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-30 09:59:37
1%胶120V,20MIN.可以用DL2000,或DL10000。500bp的MARK虽好，但条带太多，不宜操作。楼主一下点掉50多UL的mark，

我的目的条带才210bp，用DL2000不好判断吧，没有人教我，自己摸索总是会浪费的，浪费我的时间是我最烦的:-(

[ 发自小木虫客户端 ]
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把小木虫发展壮大！！！
9楼2015-03-31 10:09:52
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kuileiwawa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-30 13:56:26
marker多大的，要用2%的胶？2%的胶适合分离的范围最大的才2000

我的marker是500的，目的片段210，选这个还合适吧？

[ 发自小木虫客户端 ]
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把小木虫发展壮大！！！
10楼2015-03-31 10:11:45
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