24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

是水货

木虫 (著名写手)

食品EPI: 5
应助: 458 (硕士)
贵宾: 0.067
金币: 4287.4
散金: 509
红花: 27
帖子: 1321
在线: 160小时
虫号: 2846505
注册: 2013-12-04
专业: 食品加工技术

[求助] 做电镜的方法已有4人参与

求助：我是做蛋白凝胶的，以前做电镜都是冻干后直接去测量，现在有文献报道说做成胶体后，溶于2.5%戊二醛（pBS PH7.2)中1h。然后自来水冲洗，在采用50%,70%,80%,90%,100%的乙醇中，然后制成干样。

那么我有以下问题想咨询：
一、我做的是明胶，凝胶性较强，应当凝胶成什么状态为好？譬如浓度是6.67%，那么凝胶多久后合适？因为凝胶时间过长会导致测不出效果。
二、用不同梯度的无水乙醇洗脱，每个梯度需要的时间是多久？
三、洗脱后有的还没有完全干，有文献报道说是液氮或者干冰下弄干。实验室没有这个怎么办？
四、如果用冷冻干燥机抽真空干燥，样品中含有少量的戊二醛和乙醇，会发生危险吗？

曾经发过e-mail问过这个领域的大牛，却没得到任何回复。希望大家给予指点。

回复此楼

» 猜你喜欢

Help: SSRN无法打开，如何删除预印本？寻找能登录 SSRN 的人或方法已经有4人回复
英国利兹大学食品科学与营养学院博士研究生招聘（CSC联合培养）已经有8人回复
食品科学论文润色/翻译怎么收费? 已经有158人回复
求助新西兰租房签证已经有0人回复
葡萄糖溶液喷雾干燥已经有4人回复
凯氏定氮测粗蛋白：空白管竟藏大秘密已经有0人回复
Springer期刊投稿求助已经有4人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼2015-03-28 10:35:35

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

不倒翁X

新虫 (小有名气)

应助: 11 (小学生)
金币: 278.3
红花: 3
帖子: 149
在线: 66.3小时
虫号: 2299745
注册: 2013-02-25
性别: GG
专业: 食品科学基础

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
是水货: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-06-12 13:05:44

我说一下我实验室肉肠样品凝胶做SEM的前处理方法，你可以参考以下：将凝胶样品切成5×5×1mm（长×宽×高）立方体的薄片（切面尽量光滑平整），放入混合溶液（4%甲醛: 2.5%戊二醛=1:1, v/v）中固定2h；随后用磷酸盐缓冲液（0.1mol/L，pH7.2）漂洗6~10次，丙酮（100%）溶液梯度脱水，每次各10min，其中乙醇浓度为30%、50%、70%时在4℃环境中进行脱水；随后去除易挥发的有机溶剂，然后用真空冷冻干燥机干燥24h；观察。