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zhi900201新虫 (初入文坛)
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糖脂类生物表面活性剂用什么手段预测分子结构？ 已有1人参与
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糖脂类生物表面活性剂用什么手段预测分子结构？ [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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【答案】应助回帖
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我先用HPLC的方法把酸沉出来的粗提物大致分开，然后用制备柱收集每一个出峰的组分。文献当中他们的做法是将每一个组分拿去打核磁，然后解谱。我的样品情况是有一个组分丰度特别高，将近70%，所以如果其他少量的物质不好收集，我就准备拿这一个送去鉴定就好了。 核磁提供的是整个分子结构的信息，个人觉得应该放在结构鉴定的最后一步，其结果用来作为确定性验证比较好。 在此之前，你需要做的是一些定性的实验。 1、薄层层析显色。用茚三酮不显色排除脂肽的存在，用苯酚-硫酸显色确定糖的存在，用2,7-二氯荧光黄显色确定脂肪酸的存在，然后可以用苯胺-磷酸显色，看是不是海藻糖（海藻糖不显色，而其他糖会显色）。 2、粗提物打红外。红外提供的是官能团方面的信息，你具体关注有没有特征官能团的位置出峰就行了。要是不放心，也可以在样品纯化之后再去打个红外，比较一下这两张图的差异。 分离纯化的话，文献提到了两种，一种是过硅胶柱，然后收集对应比例洗脱液的物质。一种是直接上液相，分析柱确定方法之后用制备柱。前者优点是上样量大，缺点是损失也大，且合并要用薄层点板，展开剂的选择非常重要。——我之前是薄层用的展开剂一直不行，就是得不到单独的点，所以没办法用薄层层析对过了硅胶柱之后的样品进行合并，所以才直接用粗提物上液相来实现分离纯化。后者的优点是若方法选择适宜，各组分之间分得较开，用制备柱很容易得到纯度很高的物质。但是液相制备柱的上样量也就100uL左右，如果你的方法时间较长，那么制备也需要好几天一直守在液相前反复进样反复收集。 得到纯物质之后，就可以进行结构方面的鉴定了。 对于糖，你可以将纯品酸解之后用气象色谱或者液相作单糖组成分析，知道他确切的单糖组成，进一步可以做糖苷键分析，用来推断糖环部分的结构。 而脂肪酸的部分可以对样品进行水解分离出游离的脂肪酸，之后上GC-MS。分子结构的整体信息可以使用核磁或者质谱，最后这三个还没做过，不太清楚。 |
2楼2015-09-04 15:09:25
