应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » HRP标记抗体的非特异性反应
61/1返回列表
查看: 1577  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

mafang68

金虫 (著名写手)

[求助] HRP标记抗体的非特异性反应 已有3人参与

本人做ELISA试剂盒研发，让别的公司定制的单抗并标记的HRP，现在问题就出在HRP标记抗体的非特异性反应上，先说说实验方法和结果
方法：目的蛋白、非目标蛋白、PBS包被；封闭；加HRP标记抗体反应；显色；检测OD值。

结果：1。与目的蛋白反应很低，OD值在0.2左右；非目标蛋白的反应较高，OD值在0.6左右。（此为同一次实验的检测结果）
2. 复检HRP标记抗体与非目标蛋白反应，OD值仍很高，0.7左右。
3. 另包被PBS，与HRP标记抗体温育，竟然也显色，而且很高，OD值在1.1左右。

以上结果，不知道怎么解释，或是哪步出了问题，与厂家沟通他们也不知怎么回事。希望各位虫友不吝赐教！非常感谢！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

专业相关

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
木虫啦，哈哈
1楼 2015-03-19 15:23:33
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kongxiyang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mafang68: 金币+5, ★有帮助, 谢谢，我的封闭液用的就是BSA蛋白，而抗体稀释液要是加入蛋白俺以前的经验会增大OD值 2015-03-23 16:15:50
在封闭液或者抗体稀释液中加入一些蛋白，看能否消除干扰

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-03-21 23:55:27
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbl215

金虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mafang68: 金币+10, 谢谢，我挨个试试吧 2015-03-23 16:17:20
可能的问题：封闭时间不够，浓度不够
最可能的问题：HRP标记抗体特异性差，与目标蛋白OD值低是因为形成竞争了，换用其他物种的血清封闭再做一次。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2015-03-22 08:07:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lilyshuoxu
4楼2015-03-22 09:15:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haoziying

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mafang68: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-04-20 09:41:58
1、PBS包被，有信号值，说明整个反应体系污染了，先把包被的所有东西都换掉，再试一次。
2、目的蛋白、非目标蛋白之间的关系，怎么理解有非目标蛋白有反应。
3、要确定定制的单抗筛选的标准，是否与目的蛋白进行反应及反应的亲和力，需要对方再次核实。
4、标记的时候，抗体的结构破坏了，造成非特异反应，
赞一下 回复此楼
5楼2015-03-24 00:24:10
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kongxiyang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
mafang68: 金币+63, ★有帮助, 5 2015-04-20 09:42:14
牛血清代替BSA试一下

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
6楼2015-03-24 22:47:56
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mafang68 的主题更新
61/1返回列表
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭