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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 将单抗进行辣根过氧化物酶（HRP）标记
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蓝默儿

金虫 (小有名气)

[求助] 将单抗进行辣根过氧化物酶（HRP）标记 已有2人参与

将单抗进行辣根过氧化物酶（HRP）标记，之前用将单抗进行纯化么，
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微笑，自信，加油
1楼 2014-03-08 10:31:17
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youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蓝默儿(kx444555代发): 金币+2, 鼓励交流 2014-03-08 12:43:01
蓝默儿: 金币+1 2014-03-08 15:57:43
不用。如果你确定是单抗，不需要。
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天行健
2楼2014-03-08 11:44:26
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蓝默儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-03-08 11:44:26
不用。如果你确定是单抗，不需要。

如果单抗不纯化的话，进行标记会不会影响单抗的效价。
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微笑，自信，加油
3楼2014-03-08 16:01:42
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youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝默儿 at 2014-03-08 16:01:42
如果单抗不纯化的话，进行标记会不会影响单抗的效价。...

我还真没做过纯化单抗的事情，总觉得那么金贵的东东，对方已经帮我们纯化了
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天行健
4楼2014-03-08 17:04:27
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xiaxzhp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
蓝默儿: 金币+1 2014-03-12 10:00:33
一般单抗在使用前都已经经过纯化了，另外在标记HRP的时候不能含有甘油，溶液离子强度要比较低。
HRP标记到单抗的过程中，二者的效价都有可能降低。
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5楼2014-03-11 15:48:56
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蓝默儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaxzhp at 2014-03-11 15:48:56
一般单抗在使用前都已经经过纯化了，另外在标记HRP的时候不能含有甘油，溶液离子强度要比较低。
HRP标记到单抗的过程中，二者的效价都有可能降低。

我是刚制备好的单抗，从小鼠腹中取出，只是进行了初步离心，下步骤我要标记HRP。
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微笑，自信，加油
6楼2014-03-12 10:03:09
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蓝默儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-03-08 17:04:27
我还真没做过纯化单抗的事情，总觉得那么金贵的东东，对方已经帮我们纯化了...

谢谢你的回复。我不是买的单抗，是自己制备的单抗，从小鼠腹中取出只进行初步离心，去掉脂肪和细胞。
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微笑，自信，加油
7楼2014-03-12 10:05:32
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xiaxzhp

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 蓝默儿 at 2014-03-12 10:03:09
我是刚制备好的单抗，从小鼠腹中取出，只是进行了初步离心，下步骤我要标记HRP。...

也就是说你现在的只是小鼠腹水，那就需要纯化了。可以用proteinA/G将其纯化，然后再标记HRP。
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8楼2014-03-12 10:49:22
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ruoping521

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
蓝默儿: 金币+2 2014-03-13 08:36:00
蓝默儿: 金币+1 2014-03-17 21:01:32
最好是纯化的，标辣根酶的时候只要有氨基的蛋白都可能标记上去，如果杂蛋白过多，岂不是影响了标记效率甚至特异性？
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9楼2014-03-12 15:39:29
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向南飞

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
蓝默儿: 金币+1 2014-04-11 09:53:51
有必要纯化，有专门的柱子可以纯化多抗。
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10楼2014-04-10 21:57:45
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