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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 请问从植物愈伤组织中提取蛋白质的可行方法有哪些？
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金陵棠邑

新虫 (小有名气)

[求助] 请问从植物愈伤组织中提取蛋白质的可行方法有哪些？ 已有1人参与

我目前做的是黑荆树愈伤组织中关键酶的提取，请问从植物愈伤组织中提取蛋白质的方法一般有哪些？我看到过有用TCA-丙酮法提蛋白质的，这个方法到底怎么样？
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1楼 2015-03-09 14:37:49
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
金陵棠邑: 金币+3 2015-03-09 19:59:46
q317476148: 金币+2, 感谢 2015-03-09 22:38:36
不知道你的实验目的是什么？测定酶活性？另外，提取缓冲液的选择也和具体哪种酶有关，需要考虑保护酶活性和不引入干扰检测的物质。
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2楼2015-03-09 17:00:37
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金陵棠邑

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2015-03-09 17:00:37
不知道你的实验目的是什么？测定酶活性？另外，提取缓冲液的选择也和具体哪种酶有关，需要考虑保护酶活性和不引入干扰检测的物质。

找出影响次生代谢产物积累的关键酶，目前还不清楚究竟含有哪些酶呢。只知道它是属于黄酮类的，所以应该与生成黄酮类次生代谢物的酶类似吧，应该怎么做呢？
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3楼2015-03-09 19:59:35
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 金陵棠邑 at 2015-03-09 19:59:35
找出影响次生代谢产物积累的关键酶，目前还不清楚究竟含有哪些酶呢。只知道它是属于黄酮类的，所以应该与生成黄酮类次生代谢物的酶类似吧，应该怎么做呢？...

这不是应该从分子水平入手的课题么？单纯提粗酶液打算做什么？难道你还要纯化测活性？
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4楼2015-03-09 20:01:18
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金陵棠邑

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2015-03-09 20:01:18
这不是应该从分子水平入手的课题么？单纯提粗酶液打算做什么？难道你还要纯化测活性？...

应当是要纯化，具体看看哪些酶促进黑荆树愈伤组织中原花色素的生成
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5楼2015-03-09 20:26:24
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
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5楼: Originally posted by 金陵棠邑 at 2015-03-09 20:26:24
应当是要纯化，具体看看哪些酶促进黑荆树愈伤组织中原花色素的生成...

从粗酶纯化没什么方向性，我觉得不是个好研究思路。还是参考已知报道，从DNA水平，扩增出具有潜在活性的基因，在大肠杆菌或其他合适工程宿主中表达纯化检测活性比较好。
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6楼2015-03-09 21:46:48
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