| 查看: 2269 | 回复: 12 | ||
shengchen铜虫 (初入文坛)
|
[求助]
pfu酶使用 已有4人参与
|
| 请教各位一个问题，本人用一对引物从基因组上扩增片断，同等条件下用taq能扩出，pfu怎么也扩不出；当我用另一对引物从质粒上扩增时，同样的情况也出现了。。。并且经过测序，发现用taq扩出的目的片段都是对的，为什么pfu酶怎么也扩不出来，求教各位高手，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有178人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有1人回复
still2008
至尊木虫 (著名写手)
破碎世界的守护者
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 10630.9
- 散金: 293
- 红花: 6
- 沙发: 1
- 帖子: 1377
- 在线: 131.5小时
- 虫号: 558303
- 注册: 2008-05-14
- 专业: 皮肤形态、结构和功能异常
2楼2015-02-12 23:47:55
fuyuandj86
版主 (著名写手)
己所不欲，勿施于人
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.015
- 金币: 7578.5
- 散金: 495
- 红花: 60
- 沙发: 2
- 帖子: 1313
- 在线: 1387.3小时
- 虫号: 544795
- 注册: 2008-04-13
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
- 管辖: 生物科学
3楼2015-02-13 02:25:13
天地一微尘
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 26 (小学生)
- 金币: 7139.6
- 红花: 2
- 帖子: 114
- 在线: 117.7小时
- 虫号: 3406899
- 注册: 2014-09-10
- 专业: 生物化学
4楼2015-02-13 12:32:06
18761615793
木虫 (正式写手)
小虫
- MolEPI: 1
- 应助: 172 (高中生)
- 金币: 646.4
- 散金: 170
- 红花: 16
- 帖子: 863
- 在线: 144.9小时
- 虫号: 3603131
- 注册: 2014-12-19
- 专业: 抗体工程学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
shengchen(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-13 20:56:12
感谢参与，应助指数 +1
shengchen(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-13 20:56:12
|
呵呵，pfu的概念是高保真酶，那它为什么会有保真性呢，因为它能将错配的碱基切除，从而保真扩增中片段的正确性，所以它能切掉错误的碱基，所以它也可能将模板降解，导致扩增失败。所以，如果你的实验下游不需要进行精密实验的话，不建议使用保真酶。如果你担心普通的Taq酶扩增特异性差杂带较多的话，热启动Taq酶不是很好的选择吗，不会降解模板同时又能绝对的避免非特异性产物生成。 http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html |
5楼2015-02-13 17:06:32
shengchen
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 160.3
- 帖子: 27
- 在线: 31.3小时
- 虫号: 3561049
- 注册: 2014-11-26
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2015-02-13 20:50:04
shengchen
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 160.3
- 帖子: 27
- 在线: 31.3小时
- 虫号: 3561049
- 注册: 2014-11-26
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2015-02-13 20:53:17
shengchen
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 160.3
- 帖子: 27
- 在线: 31.3小时
- 虫号: 3561049
- 注册: 2014-11-26
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
8楼2015-02-13 20:54:41
shengchen
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 160.3
- 帖子: 27
- 在线: 31.3小时
- 虫号: 3561049
- 注册: 2014-11-26
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2015-02-13 20:55:33
10楼2015-02-14 07:31:51
