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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » QPCR做方法学验证
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chibang1220

木虫 (著名写手)

[求助] QPCR做方法学验证

现在需要用QPCR方法检测药品中宿主残留DNA，条件摸索差不多了，却通知要做方法学验证，不知道哪位大神做过，需要做哪些项目，怎么做？谢谢了
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人的差别在于业余时间
1楼 2015-02-03 14:29:45
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lijie6054

新虫 (小有名气)
先看一下你的实验是咋设计的
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2楼2015-02-03 19:05:41
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chibang1220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lijie6054 at 2015-02-03 19:05:41
先看一下你的实验是咋设计的

参考文献上的方法摸索到了QPCR的反应体系和条件，现在标曲已经得到，R2=0.9904。但是如果做方法学验证的话不知道做哪些项目，文献中都是只有准确性，精密度和种属特异性，别的项目不用做吗？比如线性，检测限等等。因为是首次接触该方法不知道怎么下手。至于设计，现在所能做的就是按文献方法做准确性，精密度和种属特异性。
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人的差别在于业余时间
3楼2015-02-04 08:53:08
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Dionysius

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
chibang1220(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2015-02-08 11:52:44
星海慧儿: 应助指数+1 2015-02-08 11:53:55
线性和定量限这些肯定是要验证的，参考ICH Q2b

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4楼2015-02-04 15:36:36
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chibang1220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Dionysius at 2015-02-04 15:36:36
线性和定量限这些肯定是要验证的，参考ICH Q2b

线性和标曲一样吗？要怎么做呢？
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人的差别在于业余时间
5楼2015-02-04 17:53:10
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iaerbgoerb

新虫 (正式写手)
方法学验证不知道怎么做，楼主学习ich和问分析人员吧
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6楼2015-02-05 08:55:46
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chibang1220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by iaerbgoerb at 2015-02-05 08:55:46
方法学验证不知道怎么做，楼主学习ich和问分析人员吧

好吧，谢谢你
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人的差别在于业余时间
7楼2015-02-05 11:41:05
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suliangask

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
chibang1220(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2015-02-08 11:53:13
星海慧儿: 应助指数+1 2015-02-08 11:53:36
标准曲线每次R2>0.95，QC样本（5-6次）2/3在80%-120%，定量下限75%-125%
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Godworks.
8楼2015-02-05 12:52:00
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chibang1220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by suliangask at 2015-02-05 12:52:00
标准曲线每次R2>0.95，QC样本（5-6次）2/3在80%-120%，定量下限75%-125%

好的，万分感谢，也就是说要做出了精密度，回收率，专属性外还要做定量限，对吗？还有别的吗？
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人的差别在于业余时间
9楼2015-02-05 15:19:20
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chibang1220

木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by suliangask at 2015-02-05 12:52:00
标准曲线每次R2>0.95，QC样本（5-6次）2/3在80%-120%，定量下限75%-125%

额。。。不是应助没法给金币。。。改一下吧？
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人的差别在于业余时间
10楼2015-02-05 15:19:55
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