应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western bloting SDS-PAGE 考马斯亮蓝 染胶 求助！
81/1返回列表
查看: 4605  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dfgu

新虫 (初入文坛)

[求助] western bloting SDS-PAGE 考马斯亮蓝 染胶 求助！ 已有2人参与

第一次在小木虫上发帖，金币不多，请大家帮帮忙。
现在在做western bloting ，跑完胶后用考马斯亮蓝染胶，照片如下
不知道是什么原因，最接近浓缩胶的地方的条带会出现颜色深浅不一的情况，
想请教请教大家。

western bloting SDS-PAGE 考马斯亮蓝 染胶 求助！
FullSizeRender.jpg


western bloting SDS-PAGE 考马斯亮蓝 染胶 求助！-1
IMG_5330.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-01-30 19:34:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

@木笔@

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dfgu(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-01-30 22:35:10
可能有以下几个问题，楼主可以考虑下。第一：胶是否完全凝固好；第二：上样的浓度是否合适，似乎有的太大了；第三，染色液和脱色液是否是新配的，建议楼主新配试试吧。
赞一下 回复此楼
做最好的自己！
2楼2015-01-30 19:41:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dfgu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-30 22:35:17
dfgu: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-01-31 12:47:00
你染色的时候是不是一直放那放着了啊，要用小摇床低速摇
胶可能有的地方先凝固了，结块了都
赞一下 回复此楼
人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
3楼2015-01-30 20:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dfgu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2015-01-30 20:23:59
你染色的时候是不是一直放那放着了啊，要用小摇床低速摇
胶可能有的地方先凝固了，结块了都

感谢回复。
您说的是第三张照片吗？那个是胶本身的问题，跑胶的时候蛋白就停在那里下不去。染色的时候也是用摇床慢慢摇着的。谢谢回复。
赞一下 回复此楼
4楼2015-01-31 12:49:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dfgu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by @木笔@ at 2015-01-30 19:41:41
可能有以下几个问题，楼主可以考虑下。第一：胶是否完全凝固好；第二：上样的浓度是否合适，似乎有的太大了；第三，染色液和脱色液是否是新配的，建议楼主新配试试吧。

感谢回复。
您说的胶的问题，后来我自己也想了想，之前配胶的时候分离胶不是特别的水平，很有可能是没有完全凝固好。
上样的浓度也有可能有些大，15well的胶，我上了20ul ，1.8ug/ul的量。
染色液应该没有问题，是新开封的CBB。
对了，我之前有看到一个western bloting 失败的帖子，不知道会不会和这个相关，想让您看一看。
我之前跑胶用的run buffer也是装在塑料瓶里放在冰箱中。
western bloting SDS-PAGE 考马斯亮蓝 染胶 求助！-2
キャプチャ.PNG
赞一下 回复此楼
5楼2015-01-31 12:57:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lakecc1

木虫 (正式写手)
是不是胶没混匀就凝固了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2015-12-19 09:19:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

msz147258

铁虫 (初入文坛)
可能是你分离胶的浓度问题，不同的浓度适用的分离范围也是不一样的
赞一下 回复此楼
7楼2015-12-31 11:34:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

喜欢牙牙丫丫

新虫 (初入文坛)
楼主，你染色一般多长时间？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-07-05 09:15:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dfgu 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[基金申请] 国自科面上基金字体 +5 iwuli 2026-03-12 6/300 2026-03-16 13:13 by Kamiu_MK
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 290求调剂 +4 @将就将就看 2026-03-10 8/400 2026-03-14 14:23 by 千千运气
[考研] 271求调剂 +10 生如夏花… 2026-03-11 10/500 2026-03-14 00:35 by 卖报员小雨
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] （081700）化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考博] 读博申请 +5 感dd 2026-03-10 7/350 2026-03-11 17:02 by QGZDSYS
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀！ 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭