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juliajuhoon木虫 (小有名气)
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[求助]
胰岛素 HPLC 已有1人参与
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中国药典2010版的含量测定方法如下： 色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（5～10μm）；0.2mol/L硫酸盐缓冲液（取无水硫酸钠28.4g，加水溶解后，加磷酸2.7ml，乙醇胺调节pH值至2.3，加水至1000ml）-乙腈（74∶26）为流动相，柱温为40℃；检测波长为214nm。取系统适应性试验用溶液20μl（取胰岛素对照品，用0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含40单位的溶液，室温放置至少24小时），注入液相色谱仪，记录色谱图，胰岛素峰和A21脱酰氨胰岛素峰之间的分离度应不小于1.8，拖尾因子应不大于1.8。 测定法 取本品适量，精密称定，用0.01mol/L盐酸溶液定量稀释制成每1ml中含40单位的溶液（临用新配，2～4℃保存，48小时内使用）。精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取胰岛素对照品适量，同法测定。按外标法以胰岛素峰面积与A21脱酰氨胰岛素峰（与胰岛素峰的相对保留时间约为1.2）面积之和计算，即得。 想问下（1）为何加乙醇胺调节PH？ （2）0.2mol/L的硫酸盐缓冲液浓度是不是太大了？ 我按药典配制了流动相，但是没有加乙醇胺，超声过滤后进行走基线，谁知一开泵走基线时管路就被堵上了。所以向大家求助。望各位大侠给予解惑！ |
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