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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 跪求！！！亲们，这些基因标记的方法、原理及操作方法是什么呢？！！
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笨笨和傻猪

银虫 (小有名气)

[求助] 跪求！！！亲们，这些基因标记的方法、原理及操作方法是什么呢？！！ 已有2人参与

1）β-半乳糖苷酶进行标记的原理，结构，操作方法是什么呢？
2）萤火虫荧光素酶进行标记的原理，结构，操作方法是什么呢？
3）红色荧光蛋白（DsRed-Express red fluorescent protein）进行标记的原理，结构，操作方法是什么呢？
跪求啊，我是想将我的一段目的基因进行标记的，通过荧光或者是显色，从而来检测我的基因表达的呢，亲们，跪求啊！~~~
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1楼 2015-01-27 21:41:08
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你要做标记的话一般的请公司给你做，过程很麻烦的，基本上蛋白标记的原理是。组成蛋白的氨基酸的侧翼官能团于荧光素的官能团连接。比如在蛋白上多设计几个赖氨酸，他的测翼官能团就能特异结合碘125，发生化学反应，就结合上个。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2015-01-27 23:39:03
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

戊二醛是一种双功能团试剂，可以使酶与蛋白质或其他抗原的氨基通过它而偶联。戊二醛交联可用一步法（如连接AP），也可用二步法（如连接HRP）。戊二醛一步法操作简便、有效，而且重复性好。缺点是交联时分子间的比例不严格，大小也不一，影响效果。制备HRP抗体结合物也可用二步法，即先将HRP与戊二醛作用，透析除去戊二醛，在pH9.5缓冲液中再与抗体作用而形成酶标抗体。此法的效率可高于一步法l0倍左右。
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采菊东篱下，悠然见南山。
3楼2015-01-28 09:41:59
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笨笨和傻猪

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 781055707 at 2015-01-28 09:41:59
戊二醛是一种双功能团试剂，可以使酶与蛋白质或其他抗原的氨基通过它而偶联。戊二醛交联可用一步法（如连接AP），也可用二步法（如连接HRP）。戊二醛一步法操作简便、有效，而且重复性好。缺点是交联时分子间的比例 ...

什么东东？
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4楼2015-01-29 18:48:48
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no1xiaowu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 笨笨和傻猪 at 2015-01-29 18:48:48
什么东东？...

这个完全看不懂
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5楼2015-09-08 06:00:29
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no1xiaowu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

β-半乳糖苷酶可以催化X-gal水解，产物是蓝色的，所以可以用来作为报告基因。
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6楼2015-09-08 06:06:42
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