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zhoubin0823

木虫 (小有名气)


[交流] 自产KOD酶pcr

实验室购买了一株BL21(PET-28a-KOD)菌株,用来表达纯化KOD酶,用来pcr。实验发现用纯化的KOD进行pcr,得到的目的条带跑电泳,在电泳的过程中,前30min有较清晰的条带,电泳1个小时后目的条带会变得很模糊,有没有人知道是什么原因?需要优化pcr条件吗?
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小小cool

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以看看这个,KOD酶表达质粒的简介http://www.miaolingbio.com/cn/product/plasmid/131.html

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
12楼2015-01-20 19:25:48
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小小cool

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
任何样品电泳1h都很模糊的,要那么久干嘛,扩散都模糊了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2015-01-20 14:34:54
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18761615793

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电泳30min是清晰的,一个小时就模糊了,很明显吗,时间长了,就跑模糊了,为什么要电泳1个小时呢,我们通常也就40min左右。换个小点的电泳槽,跑的时间短一点,这就是优化
PCR推荐用酶http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html
9楼2015-01-20 16:21:56
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ptttmt

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
羡慕,居然有KOD酶的表达菌,能否透露下价格多少?
10楼2015-01-20 16:47:44
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