24小时热门版块排行榜    

查看: 1871  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhoubin0823

木虫 (小有名气)


[交流] 自产KOD酶pcr

实验室购买了一株BL21(PET-28a-KOD)菌株,用来表达纯化KOD酶,用来pcr。实验发现用纯化的KOD进行pcr,得到的目的条带跑电泳,在电泳的过程中,前30min有较清晰的条带,电泳1个小时后目的条带会变得很模糊,有没有人知道是什么原因?需要优化pcr条件吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电泳30min是清晰的,一个小时就模糊了,很明显吗,时间长了,就跑模糊了,为什么要电泳1个小时呢,我们通常也就40min左右。换个小点的电泳槽,跑的时间短一点,这就是优化
PCR推荐用酶http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html
9楼2015-01-20 16:21:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

小小cool

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
任何样品电泳1h都很模糊的,要那么久干嘛,扩散都模糊了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2015-01-20 14:34:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ptttmt

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
羡慕,居然有KOD酶的表达菌,能否透露下价格多少?
10楼2015-01-20 16:47:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caihang

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
KOD酶都能搞到,厉害啊。以后你可以用KOD来跑菌液PCR了。
11楼2015-01-20 17:01:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见