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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 自产KOD酶pcr
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zhoubin0823

木虫 (小有名气)

[交流] 自产KOD酶pcr

实验室购买了一株BL21(PET-28a-KOD)菌株，用来表达纯化KOD酶，用来pcr。实验发现用纯化的KOD进行pcr，得到的目的条带跑电泳，在电泳的过程中，前30min有较清晰的条带，电泳1个小时后目的条带会变得很模糊，有没有人知道是什么原因？需要优化pcr条件吗？
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1楼 2015-01-20 13:32:28
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小小cool

金虫 (正式写手)
★
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任何样品电泳1h都很模糊的，要那么久干嘛，扩散都模糊了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2015-01-20 14:34:54
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18761615793

木虫 (正式写手)
★
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电泳30min是清晰的，一个小时就模糊了，很明显吗，时间长了，就跑模糊了，为什么要电泳1个小时呢，我们通常也就40min左右。换个小点的电泳槽，跑的时间短一点，这就是优化
PCR推荐用酶http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html
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9楼2015-01-20 16:21:56
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ptttmt

银虫 (正式写手)
★
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羡慕，居然有KOD酶的表达菌，能否透露下价格多少？
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10楼2015-01-20 16:47:44
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caihang

铜虫 (小有名气)
★
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KOD酶都能搞到，厉害啊。以后你可以用KOD来跑菌液PCR了。
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11楼2015-01-20 17:01:07
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