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zhoubin0823

木虫 (小有名气)


[交流] 自产KOD酶pcr

实验室购买了一株BL21(PET-28a-KOD)菌株,用来表达纯化KOD酶,用来pcr。实验发现用纯化的KOD进行pcr,得到的目的条带跑电泳,在电泳的过程中,前30min有较清晰的条带,电泳1个小时后目的条带会变得很模糊,有没有人知道是什么原因?需要优化pcr条件吗?
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小小cool

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
任何样品电泳1h都很模糊的,要那么久干嘛,扩散都模糊了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2015-01-20 14:34:54
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lijing1212

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

8楼2015-01-20 14:47:33
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18761615793

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电泳30min是清晰的,一个小时就模糊了,很明显吗,时间长了,就跑模糊了,为什么要电泳1个小时呢,我们通常也就40min左右。换个小点的电泳槽,跑的时间短一点,这就是优化
PCR推荐用酶http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html
9楼2015-01-20 16:21:56
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ptttmt

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
羡慕,居然有KOD酶的表达菌,能否透露下价格多少?
10楼2015-01-20 16:47:44
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caihang

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
KOD酶都能搞到,厉害啊。以后你可以用KOD来跑菌液PCR了。
11楼2015-01-20 17:01:07
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小小cool

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以看看这个,KOD酶表达质粒的简介http://www.miaolingbio.com/cn/product/plasmid/131.html

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
12楼2015-01-20 19:25:48
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小小cool

金虫 (正式写手)


引用回帖:
10楼: Originally posted by ptttmt at 2015-01-20 16:47:44
羡慕,居然有KOD酶的表达菌,能否透露下价格多少?

http://www.miaolingbio.com/cn/product/plasmid/131.html

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
13楼2015-01-20 19:26:02
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dmbb2楼
2015-01-20 13:57   回复  
zhoubin0823(金币+1): 谢谢参与
roubao3楼
2015-01-20 13:59   回复  
zhoubin0823(金币+1): 谢谢参与
ZloveA4楼
2015-01-20 14:19   回复  
zhoubin0823(金币+1): 谢谢参与
祝福
2015-01-20 14:24   回复  
zhoubin0823(金币+1): 谢谢参与
neu2346楼
2015-01-20 14:33   回复  
zhoubin0823(金币+1): 谢谢参与
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