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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

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[求助] HepG2细胞成团生长，且消化极其困难，如何解决？已有1人参与

HepG2细胞传代后，发现成团生长。开始以为是消化不完全，但是加大胰酶用量并延长消化时间，发现种板后细胞依然成团生长（感觉当时应该是消化开了的），而且发现胰酶消化后一加入培养基，细胞立马都聚到了一起，出现很明显的白色絮状物。求出现过类似问题的大神指点！没有出现过类似问题的虫子就不要回答了，谢谢（绝对不是染菌或者细胞老化的问题，更不是什么支原体，黑胶虫污染的问题）！

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1楼 2015-01-19 15:19:22

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779653072

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

2楼: Originally posted by 拉风蜗牛王 at 2015-04-09 14:12:15
已解决，发现是之前消化时间过长导致的。消化30s-1min后就可以用枪吹下来了，否则消化时间过长反而会导致自发聚团。

太感谢了，我现在就遇到了这个问题，消化3分钟以后细胞还是团块，以前用的6cm的培养皿，1min，1ml胰酶，现在用10cm的，2ml，3min效果不好，成团状，我下一步想试试3ml，1min，还是2ml，1min会更好？这个实验室消化完的胰酶不离心，直接传代，所以不知道2ml和3ml对细胞有没有什么影响，您有这方面的经验么？