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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

[求助] HepG2细胞成团生长,且消化极其困难,如何解决? 已有1人参与

HepG2细胞传代后,发现成团生长。开始以为是消化不完全,但是加大胰酶用量并延长消化时间,发现种板后细胞依然成团生长(感觉当时应该是消化开了的),而且发现胰酶消化后一加入培养基,细胞立马都聚到了一起,出现很明显的白色絮状物。 求出现过类似问题的大神指点!没有出现过类似问题的虫子就不要回答了,谢谢(绝对不是染菌或者细胞老化的问题,更不是什么支原体,黑胶虫污染的问题)!
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

已解决,发现是之前消化时间过长导致的。消化30s-1min后就可以用枪吹下来了,否则消化时间过长反而会导致自发聚团。
2楼2015-04-09 14:12:15
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779653072

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 拉风蜗牛王 at 2015-04-09 14:12:15
已解决,发现是之前消化时间过长导致的。消化30s-1min后就可以用枪吹下来了,否则消化时间过长反而会导致自发聚团。

太感谢了,我现在就遇到了这个问题,消化3分钟以后细胞还是团块,以前用的6cm的培养皿,1min,1ml胰酶,现在用10cm的,2ml,3min效果不好,成团状,我下一步想试试3ml,1min,还是2ml,1min会更好?这个实验室消化完的胰酶不离心,直接传代,所以不知道2ml和3ml对细胞有没有什么影响,您有这方面的经验么?
3楼2018-01-30 09:11:58
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