| 查看: 1879 | 回复: 4 | ||
[求助]
不同激发波长测得荧光强度变化怎么是相反的结果的？ 已有1人参与
|
激发波长280，测得的蛋白溶液中随加入小分子量增加，荧光强度逐渐降低。在295nm激发波长测量，测得的随加入小分子量增加，荧光强度逐渐增加。为什么会得到完全不同的两种趋势。加入的物质是白藜芦醇，加入量分别是1.25-20ug/ml，蛋白固定浓度是0.5mg/ml，本打算做蛋白被白藜芦醇荧光淬灭，重复了三次得到的也是这么个结果，280nm处随白藜芦醇浓度增加，蛋白荧光减少，295nm激发的，则荧光强度随白藜芦醇增加而增强。并且我也用BSA重复了做发现BSA在280、295nm处激发都是随白藜芦醇浓度增加荧光减弱。求大家给点意见 280nm激发.PNG  295激发.PNG |
回复此楼» 猜你喜欢
上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生
已经有3人回复
-
上海工程技术大学【激光智能制造】课题组招收硕士
已经有5人回复
-
求助院士们，这个如何合成呀
已经有4人回复
-
临港实验室与上科大联培博士招生1名
已经有9人回复
-
想换工作。大多数高校都是 评职称时 认可5年内在原单位取得的成果吗？
已经有7人回复
-
需要合成515-64-0，50g，能接单的留言
已经有4人回复
-
自荐读博
已经有4人回复
-
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？
已经有6人回复
-
带资进组求博导收留
已经有10人回复
-
最近几年招的学生写论文不引自己组发的文章
已经有11人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关紫外光谱跟荧光光谱之间联系的问题
已经有19人回复
- 怎样确定荧光光谱的激发波长
已经有3人回复
- 请大家帮忙看下银纳米簇在不同激发波长下的发射峰，请问是荧光峰吗？
已经有32人回复
- 荧光的激发波长问题
已经有5人回复
- 含有多个荧光团（喹啉和蒽）的物质怎么确定激发波长？
已经有3人回复
- 求荧光试剂的激发和发射波长
已经有7人回复
- 求助荧光光谱波长的确定
已经有7人回复
- 关于荧光物质激发波长的问题
已经有6人回复
- 急求荧光光谱中的激发和发射光谱与波长的对应关系？
已经有4人回复
- 想测一个荧光化合物的激发和发射波长
已经有10人回复
- 一个样品进行荧光光谱测定时，最大发射波长随着激发波长的改变而改变，怎么回事
已经有12人回复
- 荧光材料，有一小峰随激发波长而改变？
已经有23人回复
- 不同激发波长产生不同的荧光发射波长
已经有7人回复
- 荧光仪测出的波长与液相上使用的波长不一致
已经有3人回复
- 求高手指点：固体荧光量子产率与激发波长的关系
已经有9人回复
- 进行荧光分析时,怎样选择激发波长和荧光波长？？？
已经有5人回复
- 求助荧光计算发射波长值与实验差别比较大 有50nm，怎么办？
已经有3人回复
- 【求助】荧光检测中出现激发波长比发射波长长的情况
已经有8人回复
- 【讨论】请问 荧光光谱 怎么确定激发波长？
已经有3人回复
- 【求助】荧光 激发波长变大 发射峰位置出现蓝移
已经有6人回复
- 【求助】关于如何确定物质的荧光最大激发波长
已经有7人回复
- 【求助】请问荧光发射波长会随激发波长改变而改变吗？
已经有10人回复
wlhong2010
银虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 187.7
- 散金: 3893
- 红花: 3
- 帖子: 475
- 在线: 268.5小时
- 虫号: 2118336
- 注册: 2012-11-10
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
alql: 金币+20 2015-01-19 09:38:23
感谢参与，应助指数 +1
alql: 金币+20 2015-01-19 09:38:23
| 280nm处的激发出来的荧光主要为色氨酸和酪氨酸，且主要为色氨酸的，而295nm激发的峰主要为苯丙氨酸的。我觉得出现你那种情况可以理解吧，因为不是所有小分子对蛋白质的峰都有猝灭作用，荧光增强现象也有。考虑小分子与蛋白质作用，会改变蛋白质构象，氨基酸残基的微环境肯定也会发生一定的变化，但不一定要一致吧？！因为构象的改变可能导致某些氨基酸残基的暴露，有的被掩盖，所以出现的结果也会不一样。综上所述，你做出来的这种情况应该不矛盾。（个人意见哈！） |
2楼2015-01-18 14:39:13
3楼2015-01-19 09:38:02
wlhong2010
银虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 187.7
- 散金: 3893
- 红花: 3
- 帖子: 475
- 在线: 268.5小时
- 虫号: 2118336
- 注册: 2012-11-10
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
好吧，我记错了，295nm处是色氨酸的。先谢谢你的金币哈！你的小分子在295nm处有吸收的话，只能会导致你的荧光量子产率降低啊，而不是增强，所以才要扣內源吸收。我建议你做一个同步荧光吧，得他60nm（激发和发射的间距）出来的荧光光谱完全是色氨酸的，进一步确认下。个人愚见哈！还有就是你的蛋白浓度可以适当高一点，激发出来的峰强一些，结果会更明显点吧，另外就是溶液要稳定，以及反应时间也要一致。4楼2015-01-19 10:29:03
5楼2015-01-20 09:25:27