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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 紫外测总黄酮
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answer.

铜虫 (初入文坛)

[求助] 紫外测总黄酮 已有3人参与

样品为水提液，并经脱脂处理；国产聚酰胺经95%乙i醇泡过夜后装柱5cm，先以95%乙醇洗3遍，再以蒸馏水洗3遍；上样2ml，30min后，70%乙醇洗脱，收集有颜色的流出液，定容至10ml；取2ml于10ml容量瓶中加3ml30%乙醇，加5%亚硝酸钠5m后，加10%硝酸铝，60min后加1mol/L氢氧化钠，30%乙醇定容，紫外测吸光度；400nm-600nm内无最大吸收峰，这是什么原因？谢谢。
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justdoit.
1楼 2015-01-11 11:38:42
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匿名

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2楼2015-01-11 12:03:11
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answer.

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lich666 at 2015-01-11 12:03:11
该方法显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的。
可以试试别的方法，如三氯化铝法。

我们是按照仓公敖的《分光光度法测定保健食品功效成分》这个标准：样品测定，准确吸取定量样品溶液，加入30%乙醇液至5mL,各加5%亚硝酸钠溶液0.3mL，振摇后放置5min，加入10%硝酸铝溶液0.3mL,摇匀后放置60min，加1.0mol/L氢氧化钠溶液2mL,用30%乙醇定溶至刻度，以零管为空白，摇匀后用1cm的比色皿，在510nm处测定吸光度。
   用芦丁做对照，相同条件显色，最大吸收波长500左后。我们样品中也含有二氢黄酮。而且加了各种试剂都有颜色变化。还请师兄指点迷津
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justdoit.
3楼2015-01-11 12:31:23
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匿名

用户注销 (知名作家)

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4楼2015-01-11 12:46:24
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铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lich666 at 2015-01-11 12:46:24
再看看是不是溶液太稀了，浓缩下试试，我只能想到这些原因了。...

还是很感谢
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justdoit.
5楼2015-01-11 13:01:11
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
给你个建议吧，记得黄酮有15种母核。不同类的黄酮，的需要不同的颜色反应。你最好还是查查文献，看你的样品中使那些类黄酮居多，再选择合适的显色剂。
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我那么努力，就是为了在更高的层次遇见你！
6楼2015-01-11 14:32:38
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望陈莫及1984

铜虫 (正式写手)
为什么用水作提取剂啊？而不是50~70%的乙醇溶液？也许是你的检测方法与你的提取方法相悖。
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命中注定的自作自受
7楼2015-01-12 09:04:15
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jwr

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以参考参考《中国药典》2010年版一部“银杏叶”项下中的【含量测定】  总黄酮醇苷 的测定方法，特别是溶剂的选择。祝好运！
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8楼2015-01-12 16:44:48
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