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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 总黄酮提取工艺确定试验 黄酮含量测定时过高 究竟什么原因？
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coolling

铁虫 (小有名气)

[求助] 总黄酮提取工艺确定试验 黄酮含量测定时过高 究竟什么原因？ 已有3人参与

我做的是总黄酮的最优提取工艺确定试验   先做的是单因素试验  提取后过滤出药渣 减压旋转收干 用蒸馏水转出 用3倍量的石油醚萃取1次 然后再用95%的乙醇醇沉2天  在过滤后旋转收干  用60%乙醇 溶解定容测吸光度   有的实验结果浸膏中的黄酮含量达到了81.9% （这个样品一个月后再用相同的方法相同的仪器再次测量含量又降低到69.5%）   后来又接着做的正交试验  个别浸膏中的黄酮含量竟然超过了100%    而且用提取液定容后测黄酮含量和取浸膏溶解定容后测黄酮含量差距很大  这种情况是怎么回事 ？
我用的是紫外分光光度计测的   在258nm处   用芦丁做的标准品  没有用显色法 直接用60%乙醇定容
紧急求助 希望大家能够帮帮我 实在是弄不清楚了  感谢感谢
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1楼 2013-12-10 14:58:26
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

raulsam1984

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by coolling at 2013-12-12 12:37:50
谢谢 我做的没有用显色法 是用紫外全波长扫描得到的最大吸收波长，就是258nm  然后就直接配液了 测得 药水换波长 不是得用 显色法吗？...

楼主，由于不知道你实验的具体，但你说超过含量超过100%的原因是因为芦丁没有选取500nm的最强吸收，而在你的供试品在287处是最强吸收，导致对照品的标准曲线范围比实际要小了，供试品用这个曲线计算就大了，所以才会出现超过100%的情况。
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6楼2013-12-12 15:52:33
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剑客

木虫 (知名作家)
估计在所用这个波段下，其他物质有干扰
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8楼2013-12-13 12:51:31
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普通回帖

春天外

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
coolling: 金币+1, ★有帮助, 很穷 很穷 不过 还是很感谢 ！！！ 2013-12-12 19:41:30
考虑一下黄酮水解     水解时间不同  黄铜测得含量不同
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学习工作
2楼2013-12-11 13:30:10
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
coolling: 金币+1, ★有帮助, 不好意思了 奖励有点少 刚刚申请的账号 还很穷~~~ 2013-12-12 12:41:46
楼主，测定的时候，你可以参照《药典》一部333页槐米的总黄酮含量测定方法。（注意到你检测波长的不同，所以建议你使用500nm）
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3楼2013-12-11 15:09:27
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coolling

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-12-11 15:09:27
楼主，测定的时候，你可以参照《药典》一部333页槐米的总黄酮含量测定方法。（注意到你检测波长的不同，所以建议你使用500nm）

谢谢 我做的没有用显色法 是用紫外全波长扫描得到的最大吸收波长，就是258nm  然后就直接配液了 测得 药水换波长 不是得用 显色法吗？
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4楼2013-12-12 12:37:50
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rockfeller

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是混入别的什么物质了？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2013-12-12 13:46:04
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coolling

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 春天外 at 2013-12-11 13:30:10
考虑一下黄酮水解     水解时间不同  黄铜测得含量不同

也咨询过许多老师，说可能黄酮 变质了~~~
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7楼2013-12-12 19:42:47
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coolling

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-12-12 15:52:33
楼主，由于不知道你实验的具体，但你说超过含量超过100%的原因是因为芦丁没有选取500nm的最强吸收，而在你的供试品在287处是最强吸收，导致对照品的标准曲线范围比实际要小了，供试品用这个曲线计算就大了，所以才 ...

嗯 明白了 谢谢~~~
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9楼2013-12-15 12:22:47
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coolling

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 剑客 at 2013-12-13 12:51:31
估计在所用这个波段下，其他物质有干扰

是的  杂质太多  且都在这个波段有紫外吸收
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10楼2013-12-15 12:24:23
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