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lazymiaomi

新虫 (初入文坛)

[求助] 紫外测总黄酮含量,空白对照有问题

我是做中药材总黄酮含量测定(药材是用70%甲醇提的),用槲皮素做对照,在372nm下测(用的石英比色皿),之前是按照亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠的方法显色,然后用70%甲醇定容,空白除了没加药,剩下的都加了。放到仪器中,调零后,就发现,刚调零的数值就开始自己往上蹦,调零的速度都赶不上它蹦的速度。到底是为什么呢?如果是因为空白溶液不均匀的话,是因为室温很低,所以配的亚硝酸钠那三种试剂有析出吗?那三种显色剂配完能放多久呢?拜托各位指导一下我吧……真心抑郁呢……

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33088605

铁虫 (正式写手)

general

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karl2100: 金币+1, 谢谢回帖! 2013-01-04 23:39:21
lazymiaomi: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢,但是楼主很穷。。。 2013-01-11 13:04:18
紫外检测所受的影响因素很多,样品中如果气泡过多也会出现这样的情况。不知道你地东西稳定不稳定,如果稳定性还可以的话,楼上所说的方法都不管用的话可以尝试将样品超声下。我们之前做过得一些样品是要超声除去里面的CO2的。
伟大的人不需要个人签名
8楼2013-01-04 16:32:11
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lazymiaomi

新虫 (初入文坛)

那三样显色试剂可能是我没密封保存,我们实验室环境太差了,所以都变了,每次都重配后,空白就没有问题了。
药典说要放置15分钟,再测吸光度,可是数值下降超快,几秒钟就能下降0.01,正常吗?
11楼2013-01-10 20:35:59
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ronzelau

铁虫 (小有名气)

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xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-04 10:50:24
lazymiaomi: 金币+2, ★★★很有帮助, 第一个回复我的人,谢谢你啦,但我是新来的,实在很穷,不好意思啊。。 2013-01-10 20:45:19
理论上不会出现空白增大的情况,建议重配主要试剂再试

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事在人为!
2楼2013-01-03 23:58:03
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

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xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-04 10:50:36
lazymiaomi: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢~楼主有点穷。。不好意思。。 2013-01-10 20:46:38
楼主,你的显色剂最好重配一下,因为我也做过相同的实验,基本上是没有任何问题的。还有三种显色剂配完可以放20分钟。
5楼2013-01-04 10:00:08
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兔子少爷

银虫 (正式写手)

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xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-06 19:46:53
lazymiaomi: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢,但是楼主很穷。。。 2013-01-11 13:04:35
之前是按照亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠的方法显色,具体的可以说一下,还有这些试剂放几天一般都没有问题的,只放空白试剂试试仪器的稳定性和精确性。
9楼2013-01-06 14:53:46
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lazymiaomi

新虫 (初入文坛)

今天试剂都重配了,测的都很正常,可是如果每次都重配,真得好麻烦啊……看看明天再用那些试剂测一下,正不正常吧……

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10楼2013-01-08 15:27:28
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ronzelau

铁虫 (小有名气)

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xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-06 19:47:01
理论上不会出现空白增大的情况,建议重配主要试剂再试

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事在人为!
3楼2013-01-03 23:58:27
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waterma

木虫 (小有名气)

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xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-04 10:50:29
lazymiaomi: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢~楼主有点穷。。不好意思。。 2013-01-10 20:46:13
个人认为是显色剂未稳定造成,建议先以空比色皿为空白,测定空白试剂分别在1min,3min,5min等时间间隔的吸光度,测定显色剂稳定时间。
4楼2013-01-04 08:35:25
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lazymiaomi

新虫 (初入文坛)

谢谢各位~我会重配试试的……这三种显色剂每次用都要重配吗?都能放多久呀?

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6楼2013-01-04 14:57:12
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accn

新虫 (小有名气)

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karl2100: 金币+1, 谢谢! 2013-01-04 23:39:00
lazymiaomi: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢~楼主有点穷。。不好意思。。 2013-01-10 20:46:57
空白还是很稳定的,经常做,各个溶液配好后保存几个月都没问题,常温
样品倒是要注意,避光会稳定点
7楼2013-01-04 15:51:12
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