| 查看: 2142 | 回复: 5 | |||
keven7928至尊木虫 (知名作家)
水手
|
[求助]
求核酸染料有哪些？ 已有4人参与
|
| 最近在做基因传递的试验，用激光共聚焦观察材料和基因的胞内轨迹，想用YOYO1标记DNA,RhB标记材料，但是YOYO1太贵了，买不起，还有其他可以用的染料吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有68人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 病毒如何采用荧光染料标记
已经有3人回复
- 核酸电泳染料EB取代品
已经有11人回复
- 核酸琼脂糖凝胶电泳
已经有7人回复
- 核酸花青素染料的原理是？？？？
已经有5人回复
- 已删除
已经有7人回复
- 请教使用gel red 染料的同学们，你们使用的琼脂糖都是什么品牌什么型号的？
已经有42人回复
- 关于核酸染料标记DNA
已经有8人回复
- 关于核酸染料标记DNA
已经有21人回复
- SYGR Green核酸染料I 怎么样才能将胶染好
已经有12人回复
- 蓝色的染料有哪些？带有羧基的
已经有6人回复
- 核酸染料GELVIEW的成分谁知道啊，怎么跟EB一个颜色啊？具体毒性？
已经有14人回复
- 核酸染料胶染电泳后一半暗一半亮，求助！
已经有23人回复
- 哪有耐碱的绿色染料？宽pH使用的染料
已经有5人回复
- 除了溴化乙锭外 还有什么比较好的毒性比较小的内嵌式DNA染料啊
已经有6人回复
- 请问Eb的全称是什么？
已经有5人回复
- 【求助/交流】百泰克的UltraPowerTM核酸染料和绿如蓝核酸染料
已经有8人回复
- 【求助】影响活性染料固色率的因素有哪些呢？
已经有6人回复
- 【求助/交流】你们实验室用的是什么核酸染料
已经有52人回复
- 【求助/交流】想问一下各位电泳跑胶用的染料是什么
已经有38人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
keven7928: 金币+2, ★有帮助 2015-01-09 12:04:12
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:35:16
感谢参与，应助指数 +1
keven7928: 金币+2, ★有帮助 2015-01-09 12:04:12
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:35:16
|
电泳后，核酸需经染色才能显色出带型，常用以下核酸染色剂： 1、溴化乙锭（ethidium bromide, EB） 最常用的核酸荧光染料，可嵌入核酸双链的配对碱基之间，在紫外线激发下，发出桔红色荧光。 EB-DNA复合物中的EB发出的荧光，比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍，因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型。若EB背景太深，可将凝胶 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCl2中5min，使非结合的EB褪色，这 样可检查到10ng的DNA样品，EB也可用于检测单链DNA或RNA，但其对单链核酸的亲和力相对较小，荧光产率也相对较低。 在凝胶或电泳缓冲液中加入终浓度为0.5μg/ml的EB，染色可在电泳过程中进行，能随时观察核酸的迁移情况。但EB带正电荷，嵌入碱基后增加了 核酸分子的刚性，使迁移率减慢，故不宜用于测定核酸分子量的大小，这时应在电泳后将凝胶浸入0.5μg/ml的EB水溶液中10min进行染色。EB见光 易分解，应于4℃避光保存， 2、吖啶橙（acridine orange, AO）： 吖啶橙可嵌入双链核酸碱基对之间，在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光；还通过静电与单链核酸的磷酸基结合，在254nm紫外线激发 下产生640nm的红色荧光。因此可区分单链和双链核酸，灵敏度分别为0.1μg和0.05μg。但吖啶橙的染色操作要求严格，应在 22℃，0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.0）中避光浸泡30min，然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时。 3、银（Ag+）试剂： Ag+与核酸形成稳定复合物，然后用甲醛使Ag+还原成银颗粒。AgNO3等试剂可使聚丙烯酰胺凝胶上的单链，双链DNA及 RNA都染成黑褐色。银染法的灵敏度比EB染色高200倍左右，比亚甲蓝染色高100~1000倍，在小于0.5mm厚的凝胶中，能检测出0.5ng的 RNA，其缺点是专一性不强，能与蛋白质，去污剂反应也产生褐色，而且对DNA的染色定量不准确。银与DNA稳定结合，对DNA有破坏作用，不适于DNA 片段回收的制备。 4、亚甲蓝（methylene blue） 可将RNA染成蓝色，但灵敏度不高，而且操作时间长。染色过程：胶浸泡于0.02%的亚甲蓝，10mmol/L Tris-Ac（pH8.3），4℃放置1~2h，用净水洗5~8h（反复换水），带型肉眼可见，最低检测量为 250ng。 |
2楼2015-01-08 22:29:46
keven7928
至尊木虫 (知名作家)
水手
- 应助: 22 (小学生)
- 金币: 20374.2
- 散金: 2203
- 红花: 20
- 帖子: 5651
- 在线: 608.8小时
- 虫号: 584169
- 注册: 2008-08-01
- 性别: GG
- 专业: 药剂学
3楼2015-01-09 12:05:08
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2015-01-09 14:54:25
genhunter
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 259 (大学生)
- 金币: 9757.4
- 散金: 10
- 红花: 60
- 帖子: 2484
- 在线: 1793小时
- 虫号: 2558361
- 注册: 2013-07-22
- 专业: 肿瘤化学药物治疗
5楼2015-02-23 12:31:29
mao19881205
金虫 (小有名气)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 981.4
- 散金: 149
- 红花: 2
- 帖子: 174
- 在线: 68.5小时
- 虫号: 1367660
- 注册: 2011-08-13
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
6楼2015-02-26 08:53:00
10