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zhnvren

铁虫 (小有名气)

[交流] 帮忙看一下这根高效液相色谱柱子能用吗? 已有4人参与

做实验在实验室找到一根柱子,询问了一下,算新的吧,但是出产日期是2010年7月的,后来都没使用过,柱子出产时检测的流动相是65%乙腈/水,说明书上说可用纯水做流动相,柱子牌子是赛分科技(Sapphire蓝宝石系列),另外还有两根分别是迪马科技DiamonsilC18(2)、Hypersil BDS C18,出产时间都差不多,问这些柱子能用吗?哪根能用?谢谢。
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yuecen

金虫 (正式写手)


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4楼: Originally posted by zhnvren at 2014-12-28 22:24:27
你好!如何试呀?是用80%甲醇冲吗?冲多久啊?流速是多少啊?标准品用中性还是偏酸碱的?麻烦不惜赐教,先谢谢了。我是做黄连的时候发现自己平常用的柱子没有封端,而这三条都有封端,所以想打这三条的主意了。...

一般的色谱柱在出厂时均保留在纯的甲醇或乙腈等有机溶剂中,所以拿到一个新的色谱柱首先要用纯的有机溶剂冲洗。但你的柱子不确定是否有用有机溶剂封存,所以建议先用50%甲醇水冲柱,底流速大概0.4或0.5,如果柱压不是特别高,1小时后流速调到1,继续冲1小时,然后换90%甲醇冲1小时,然后换90%乙腈冲1小时。之后你就可以正常换50%甲醇水或乙腈水冲柱,冲流动相配比的甲醇水或乙腈水,冲流动相啦。如果你有时间的话可以将所有冲柱时间延长,如果没有时间半个小时也可以,就怕效果不好,毕竟之前不是自己用的。
可以配制含苯、萘或联苯的甲醇溶液,浓度10μl/ml ,流动相甲醇:水(85:15, v/v) ,l流速0.8 ml/min,进样量5μl,检测波长254nm。如果你没有这些物质,就随便找点实验室现有的药品,最好是师兄师姐们做过的药物,流动相简单,峰型较好的,检测波长比较高的,来试试柱效。只要出峰对称,柱效还行,就可以用。

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5楼2014-12-29 08:39:27
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gwmgyp

版主 (知名作家)

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色谱柱不试怎么能知道呢?就算是新的也得活化一下才能用着试试看,一根柱子好与不好是针对一个化合物及其杂质来讲的,也许不适合这个项目,但另外一个项目就有可能做着分离得很好!试验不能靠猜测与人为感光的!
gwmgyp
6楼2014-12-29 16:42:43
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yuecen

金虫 (正式写手)


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亲,你只能先把这三根柱子活化后,用标准品试试,才能确定这些柱子是不是还能用啊,如果柱子没有什么污染,里面的键合键也没有怎么断裂的话,标准品柱效能构接受柱子就可以用啊
2楼2014-12-28 11:38:19
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lovedich

至尊木虫 (知名作家)


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得试了才会知道能不能用。
3楼2014-12-28 13:12:06
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zhnvren

铁虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by yuecen at 2014-12-28 11:38:19
亲,你只能先把这三根柱子活化后,用标准品试试,才能确定这些柱子是不是还能用啊,如果柱子没有什么污染,里面的键合键也没有怎么断裂的话,标准品柱效能构接受柱子就可以用啊

你好!如何试呀?是用80%甲醇冲吗?冲多久啊?流速是多少啊?标准品用中性还是偏酸碱的?麻烦不惜赐教,先谢谢了。我是做黄连的时候发现自己平常用的柱子没有封端,而这三条都有封端,所以想打这三条的主意了。
4楼2014-12-28 22:24:27
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主


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不好意思,敲错字了,应该是"不能靠人为感觉的"
gwmgyp
7楼2014-12-29 16:46:42
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zhnvren

铁虫 (小有名气)

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5楼: Originally posted by yuecen at 2014-12-29 08:39:27
一般的色谱柱在出厂时均保留在纯的甲醇或乙腈等有机溶剂中,所以拿到一个新的色谱柱首先要用纯的有机溶剂冲洗。但你的柱子不确定是否有用有机溶剂封存,所以建议先用50%甲醇水冲柱,底流速大概0.4或0.5,如果柱压不 ...

非常感谢。我试试看。
8楼2014-12-31 21:06:59
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zhnvren

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by gwmgyp at 2014-12-29 16:42:43
色谱柱不试怎么能知道呢?就算是新的也得活化一下才能用着试试看,一根柱子好与不好是针对一个化合物及其杂质来讲的,也许不适合这个项目,但另外一个项目就有可能做着分离得很好!试验不能靠猜测与人为感光的!

谢谢回帖。
9楼2014-12-31 21:12:02
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zhnvren

铁虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by lovedich at 2014-12-28 13:12:06
得试了才会知道能不能用。

10楼2014-12-31 21:19:55
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