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Kobe君临天下铁杆木虫 (著名写手)
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关于two-step PCR 已有3人参与
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In this study, we used a two-step PCR protocol as previously described (19). With this approach, tags and adapters were added in a second round of PCR amplification. This method facilitates DNA amplification from complex biological samples (20), increases reproducibility, and recovers higher genetic diversity, avoiding the amplification bias that is introduced by using long fusion primers in one-step PCR amplification。 我是小白一个，这里面的tag 和adapter分别是什么意思啊？还有，最主要的:这个two-step PCR 是一个什么方法，能不能就具体讲一下，因为要向老师汇报这篇文章，但是对这个完全不了解啊，去哪里找找这方面的资料？ |
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那我就简单讲一下我知道的，通常我们说两步pcr和三步pcr，是根据 PCR的变性、退火、延伸来分。而两步PCR就是只有变性和退火延伸两个步骤。 而你这文章所指的应该是RT-PCR，虽然你截取的部分没出现这词，但是看了一下就是指这个。 其中一步RT-PCR就是反转录和pcr扩增在同一管中同时进行，样本量足的时候可以这样做。 两步RT-PCR就是分开，先逆转录，然后再加引物和其他东西进行PCR扩增反应，这样可以减少不必要的扩增产物（就是扩增偏移）。 |
8楼2014-12-18 15:44:59
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