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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 铁细菌 测OD值 培养基颜色太深，怎么办？？？？
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找资料什么的

新虫 (小有名气)

[求助] 铁细菌 测OD值 培养基颜色太深，怎么办？？？？ 已有8人参与

本人不是生物专业，想知道铁细菌大致生长趋势，由于之前打算平板计数来的结果失败了，时间原因吧，放弃了，改测OD值了，问题出现了  ：
               
  培养基颜色太深了，棕色那种，我之前看文献有在400nm下测出来的是0.15左右，于是，我也在400nm下测发现，根本不可能得到这个数，一定是稀释过的，但文献中却没有提稀释倍数，如果我继续想用400nm测，我该如何操作呢，稀释多少倍呢，想知道具体步骤啊？请大神不吝赐教，感激不尽
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即便是蜗牛，也要心怀变乌龟的乐观心态！
1楼 2014-12-17 21:01:08
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

choly

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
稀拾，，取出来的不能再放回去，扔掉

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爱科学，爱成长，爱生命
8楼2014-12-19 10:22:35
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云忠听雨

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
取出来再放回去不就污染了么，需要稀释的话取样少点不就弥补了
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10楼2014-12-19 14:13:09
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puresnowlqin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

同意7楼的做法，当然如果培养基本身澄清也可以把空白培养基的OD值减去，消除颜色差异。个人觉得OD400有点小，应该用石英皿测更准确。
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最喜欢的就是最好的。
20楼2014-12-22 13:37:22
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普通回帖

射手双人余

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-12-18 18:31:06
找资料什么的: 金币+3, ★有帮助 2014-12-18 21:36:29
培养基配好后过滤一下

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2楼2014-12-17 23:56:42
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296399184

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2014-12-18 18:30:56
找资料什么的: 金币+5, ★有帮助 2014-12-20 14:08:35
1.如楼上，确保培养基均一。
2.在测定数值之前，仪器都要开机稳定。(我们的核酸蛋白质分析仪测OD值一般要开机稳定30分钟)
3.如果需要，可以把你的菌液稀释10倍，100倍。（具体倍数自己估着一点）
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找资料什么的
闷葫芦
3楼2014-12-18 15:02:08
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找资料什么的

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 射手双人余 at 2014-12-17 23:56:42
培养基配好后过滤一下

过滤的目的是什么呢？
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即便是蜗牛，也要心怀变乌龟的乐观心态！
4楼2014-12-18 18:42:00
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找资料什么的

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 296399184 at 2014-12-18 15:02:08
1.如楼上，确保培养基均一。
2.在测定数值之前，仪器都要开机稳定。(我们的核酸蛋白质分析仪测OD值一般要开机稳定30分钟)
3.如果需要，可以把你的菌液稀释10倍，100倍。（具体倍数自己估着一点）

额，今天证实了，之前测可能存在仪器不稳定，但是在稳定之后，400nm下，500ML去离子水，1ML菌液的话是 0.332   我请问一般稀释之后的菌液你们都扔了么？别人用原液测的要放回原培养基？
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即便是蜗牛，也要心怀变乌龟的乐观心态！
5楼2014-12-18 18:46:14
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射手双人余

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 找资料什么的 at 2014-12-18 18:42:00
过滤的目的是什么呢？...

配制的培养基一般都有不溶物，对OD值有影响，且培养基均一性不好

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6楼2014-12-18 23:02:11
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wt29088

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以离心，取菌体沉淀，然后拿水重悬，以水为空白测OD600
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7楼2014-12-19 09:44:01
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296399184

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 找资料什么的 at 2014-12-18 18:46:14
额，今天证实了，之前测可能存在仪器不稳定，但是在稳定之后，400nm下，500ML去离子水，1ML菌液的话是 0.332   我请问一般稀释之后的菌液你们都扔了么？别人用原液测的要放回原培养基？...

稀释后的菌液不能再放回原培养基了，防止污染，一般来说你梯度稀释的话用不了多少菌液的。
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闷葫芦
9楼2014-12-19 11:36:00
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