应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于酵母筛库的疑问
汕头大学海洋科学接受调剂
81/1返回列表
查看: 6823  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ft3049527

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于酵母筛库的疑问 已有2人参与

最近在做酵母筛库, 诱饵蛋白转的是AH109菌株, 文库是公司做的Y187酵母菌株. 诱饵蛋白转化了AH109后, 酵母的生长速率明显变慢,无论是在平板上还是用SD/-Trp液摇菌的过程中。

用SD/-Trp液摇转化了诱饵蛋白菌株的酵母，用了26个小时，挑的还不仅仅是但菌落，才摇到OD600值0.6，然后进行了酵母接合生殖，接合生殖20h后有观察到酵母成功接合的现象。

在酵母接合生殖后，涂在SD/-Leu板上的酵母2天就长出菌落，但是涂SD/-Trp板上的酵母4天后才长出较小的菌落，涂二缺板的除了稀释1/10平板上长了一个菌落,其他都暂时未能长菌落。四缺板上也暂时没有酵母菌落长出。

希望有这方面经验的大牛来解答一下疑问，如果我的目的蛋白对酵母生长有一定的抑制作用，还可以这么做吗？ 另外，我的AH109酵母菌株长得菌落直径最大也在5mm, 而这次涂SD/-Leu的Y187菌落有直径在1CM以上的菌落，这样正常吗？

酵母文库筛选的方法是按照clonetech的指导进行实验的。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-12-17 11:24:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-19 15:03:39
你没有做诱饵菌株毒性测试吧，这个是必须的

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-12-17 15:19:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李小同

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-12-19 15:03:44
诱饵蛋白对酵母有毒性，这个说明书上都有写的
赞一下 回复此楼
3楼2014-12-19 10:26:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ft3049527

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-12-17 15:19:13
你没有做诱饵菌株毒性测试吧，这个是必须的

我试过几次，有时候摇的到1.2，这次差一点。毒性除了影响生长外，还会怎如何影响酵母的接合生殖呢？从我涂-Trp板的菌落数量来看，应该不是菌数量不够的问题。
赞一下 回复此楼
4楼2014-12-19 10:35:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ft3049527

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 李小同 at 2014-12-19 10:26:19
诱饵蛋白对酵母有毒性，这个说明书上都有写的

所以呢？就不能做了？
赞一下 回复此楼
5楼2014-12-19 10:35:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李小同

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ft3049527 at 2014-12-19 10:35:25
所以呢？就不能做了？...

按照标准步骤上来说，有毒性是肯定不行的，你可以打电话去clonetech的技术支持那里问一下，有没有什么解决办法
赞一下 回复此楼
6楼2014-12-19 14:26:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dqff353

新虫 (初入文坛)
学习了
回复此楼
7楼2015-04-07 11:11:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刁进进

木虫 (初入文坛)
请问您有酵母Y187的和AH109菌株吗？我最近想做点酵母双杂的实验，可以给我一些吗？或者跟您购买也行。
赞一下 回复此楼
8楼2015-11-20 15:40:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ft3049527 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿沪9，生物学326求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-15 3/150 2026-04-15 11:40 by chixmc
[考研] 297，工科调剂? +6 河南农业大学-能 2026-04-14 6/300 2026-04-14 16:04 by Art1977
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 305求调剂 +8 玛卡巴卡boom 2026-04-11 8/400 2026-04-14 09:04 by pengliang8036
[基金申请] 有爆料，一个青年教师卖房得400万，然后换了一个四青帽子 +11 babu2015 2026-04-08 11/550 2026-04-13 16:33 by probebill
[考研] 2本，初试303，0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 322求调剂 +6 123安康 2026-04-12 13/650 2026-04-12 15:51 by 123安康
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 机械专硕270求调剂，接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 一志愿北理工298英一数二已上岸，感谢各位老师 +14 Reframe 2026-04-10 16/800 2026-04-10 23:07 by caotw2020
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 070300化学 求调剂 +13 73372112 2026-04-08 13/650 2026-04-09 20:22 by maddjdld
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭