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关于酵母筛库的疑问已有2人参与
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最近在做酵母筛库, 诱饵蛋白转的是AH109菌株, 文库是公司做的Y187酵母菌株. 诱饵蛋白转化了AH109后, 酵母的生长速率明显变慢,无论是在平板上还是用SD/-Trp液摇菌的过程中。 用SD/-Trp液摇转化了诱饵蛋白菌株的酵母，用了26个小时，挑的还不仅仅是但菌落，才摇到OD600值0.6，然后进行了酵母接合生殖，接合生殖20h后有观察到酵母成功接合的现象。 在酵母接合生殖后，涂在SD/-Leu板上的酵母2天就长出菌落，但是涂SD/-Trp板上的酵母4天后才长出较小的菌落，涂二缺板的除了稀释1/10平板上长了一个菌落,其他都暂时未能长菌落。四缺板上也暂时没有酵母菌落长出。 希望有这方面经验的大牛来解答一下疑问，如果我的目的蛋白对酵母生长有一定的抑制作用，还可以这么做吗？ 另外，我的AH109酵母菌株长得菌落直径最大也在5mm, 而这次涂SD/-Leu的Y187菌落有直径在1CM以上的菌落，这样正常吗？ 酵母文库筛选的方法是按照clonetech的指导进行实验的。 |
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