| 查看: 6979 | 回复: 7 | ||
[求助]
关于酵母筛库的疑问 已有2人参与
|
|
最近在做酵母筛库, 诱饵蛋白转的是AH109菌株, 文库是公司做的Y187酵母菌株. 诱饵蛋白转化了AH109后, 酵母的生长速率明显变慢,无论是在平板上还是用SD/-Trp液摇菌的过程中。 用SD/-Trp液摇转化了诱饵蛋白菌株的酵母，用了26个小时，挑的还不仅仅是但菌落，才摇到OD600值0.6，然后进行了酵母接合生殖，接合生殖20h后有观察到酵母成功接合的现象。 在酵母接合生殖后，涂在SD/-Leu板上的酵母2天就长出菌落，但是涂SD/-Trp板上的酵母4天后才长出较小的菌落，涂二缺板的除了稀释1/10平板上长了一个菌落,其他都暂时未能长菌落。四缺板上也暂时没有酵母菌落长出。 希望有这方面经验的大牛来解答一下疑问，如果我的目的蛋白对酵母生长有一定的抑制作用，还可以这么做吗？ 另外，我的AH109酵母菌株长得菌落直径最大也在5mm, 而这次涂SD/-Leu的Y187菌落有直径在1CM以上的菌落，这样正常吗？ 酵母文库筛选的方法是按照clonetech的指导进行实验的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景
已经有0人回复
-
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有231人回复
-
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析
已经有1人回复
-
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展
已经有0人回复
-
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍
已经有0人回复
-
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner
已经有0人回复
-
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner
已经有0人回复
-
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner
已经有0人回复
-
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner
已经有0人回复
-
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 毕赤酵母转化后遗传霉素筛选问题
已经有14人回复
- 重组酿酒酵母转化子筛选的问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】酵母杂交筛库涂布皿的数量
已经有4人回复
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2014-12-17 15:19:13
3楼2014-12-19 10:26:19
4楼2014-12-19 10:35:08
5楼2014-12-19 10:35:25
6楼2014-12-19 14:26:46
7楼2015-04-07 11:11:56
8楼2015-11-20 15:40:13