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天空的蓝

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于已保种细菌镜检纯化 已有3人参与

本人刚进入微生物学习不久
想请教下大家
我之前做过一批细菌,因为赶时间就没有镜检也没有纯化直接从平板上挑取的单菌落进行保种。现在想要纯化菌种,请问可以直接从保种管里挑取菌进行镜检来确定该管的细菌是否为纯的吗?请说明理由~~
谢谢大家
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
天空的蓝: 金币+30, 有帮助 2014-12-03 09:14:38
单纯镜检不够,有时候同一种菌长短胖瘦都有差别,为让你困惑的,还要结合划线,看单菌落表型是否相似
2楼2014-12-03 08:53:30
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云忠听雨

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
天空的蓝: 金币+30, 有帮助 2014-12-03 09:18:31
这需要经常纯化的,一次性是得不到较高纯度的菌株。挑取单菌落得到的是菌种纯;如果条件允许,可挑取单细胞移植传代,得到的是菌株纯的。一个是群体纯,容易出现“性状分离”,一个是个体纯,你自己感受下。
3楼2014-12-03 09:00:56
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天空的蓝

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2014-12-03 08:53:30
单纯镜检不够,有时候同一种菌长短胖瘦都有差别,为让你困惑的,还要结合划线,看单菌落表型是否相似

意思就是必须从保种管中挑菌划线,再镜检吗?
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4楼2014-12-03 09:15:49
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天空的蓝

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 云忠听雨 at 2014-12-03 09:00:56
这需要经常纯化的,一次性是得不到较高纯度的菌株。挑取单菌落得到的是菌种纯;如果条件允许,可挑取单细胞移植传代,得到的是菌株纯的。一个是群体纯,容易出现“性状分离”,一个是个体纯,你自己感受下。

谢谢你~那就是说先从保种管中挑菌划线然后取单菌落镜检,如果纯的话就可以直接保种了吗?
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5楼2014-12-03 09:18:14
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云忠听雨

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 天空的蓝 at 2014-12-03 09:18:14
谢谢你~那就是说先从保种管中挑菌划线然后取单菌落镜检,如果纯的话就可以直接保种了吗?...

正常情况下是可以了,如果不放心,多纯化几次,一般两次纯度就不错了。保种时最好做个实验测定生长曲线,培育到对数期末期较好,不要采用菌株发育旺盛的温度培养,稍低一点。
6楼2014-12-03 09:35:01
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天空的蓝

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 云忠听雨 at 2014-12-03 09:35:01
正常情况下是可以了,如果不放心,多纯化几次,一般两次纯度就不错了。保种时最好做个实验测定生长曲线,培育到对数期末期较好,不要采用菌株发育旺盛的温度培养,稍低一点。...

好的   谢谢
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7楼2014-12-03 12:41:58
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xyj114114

木虫 (著名写手)

★ ★
dllchina: 金币+2, good 2014-12-05 22:26:13
你好,直接从甘油管里挑菌,在进行平板划线,检查形成的单菌落,在镜检可以的。但是你保证是在无菌操作的条件下进行,在这个过程中人为因素可能会带来污染,你就认为保管里的菌不纯。在学生保藏的过程中,时常发生。一般认为保菌程序是:分离得到的单菌落--反复划线---获得单菌落---染色镜检---挑单菌落---保藏甘油管---贴标签。如果你是先保藏,后来再镜检,那就容易把保管污染,导致重新再保藏。祝你成功。
8楼2014-12-04 08:57:25
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 天空的蓝 at 2014-12-03 09:15:49
意思就是必须从保种管中挑菌划线,再镜检吗?...

对的,然后测个序,你就更放心啦
9楼2014-12-05 22:25:28
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小枚mei

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


dllchina: 金币+1, 鼓励应助 2014-12-07 22:14:21
镜检,划线,稀释,再划线塞,镜检,反复几次

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2014-12-06 12:42:31
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