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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 对全血样品的预处理问题
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yjt123

新虫 (初入文坛)

[求助] 对全血样品的预处理问题 已有4人参与

各位虫子们：
   请教你们有关做药动学的几个问题。
    对于新鲜取出的大鼠全血样品，需要离心取血浆，然后加入沉淀剂沉淀蛋白，再离心，取上清液，再加入萃取剂萃取成分，再离心，取上清液进液相。我看大多数文献都是这样操作的。那么，沉淀剂用量应该怎么把握呢？离心的转数和时间又有怎样把控呢？如何判别离心的已经完全，有什么标准和经验么？
                                                                                                                                                                                                                                                   谢谢！
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1楼 2014-11-20 16:58:02
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renzhichu525

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yjt123: 金币+1 2014-11-21 09:34:09
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-11-22 21:33:17
你说的这个属于血浆的预处理过程，沉淀剂可按照1:3比例加入，14000转/分（或最高转速）离心5分钟就好了。
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2楼2014-11-21 08:36:03
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yjt123: 金币+1 2014-11-21 09:34:00
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-11-22 21:33:22
沉淀剂用量是血浆体积的2~3倍，离心的话我一般用的是12000，离心10min
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3楼2014-11-21 08:39:43
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yjt123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by stingdhk at 2014-11-21 08:39:43
沉淀剂用量是血浆体积的2~3倍，离心的话我一般用的是12000，离心10min

那么，离心有说到什么程度就大概可以了的说法么？
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4楼2014-11-21 09:35:03
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)
★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-11-22 21:33:28
引用回帖:
4楼: Originally posted by yjt123 at 2014-11-21 09:35:03
那么，离心有说到什么程度就大概可以了的说法么？...

好像没有什么特别具体的说法吧，我们这边进质谱的样品要求10000转以上离心至少10min，到什么程度这个没有概念
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5楼2014-11-21 14:10:39
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-11-22 21:33:34
yjt123: 金币+1 2014-11-23 11:23:47
你可以使用肝素氯化钠溶液，我当时用的是一支注射液加100ml盐水。采血前使用肝素溶液润洗一下离心管，等离心管干燥后再把血放到里边。置于转速，如果你要红细胞2000-3000rpm就可以，如果不要红细胞，建议5000-10000rpm离心，因为离心太慢，可能会溶血，影响分析。10000rpm三到五分钟就够了。
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微信公众号：Pharmaguider（药事纵横），主页：www.pharmaguider.cn
6楼2014-11-22 17:51:37
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lingshu

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yjt123: 金币+1 2014-11-23 11:24:00
离心取血浆那一步 我们都是用的4度3000转10分钟   绝对木有问题  哈哈……

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7楼2014-11-22 23:26:10
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