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sunrq516516

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质质谱分析样品预处理已有3人参与

从来没做过这个,老板跟我说就是直接把WB的胶切下来送去做就可以了。想问一下有经验的朋友:

1) 要进行质谱检测,需要的上样量一般是多少?
2) 胶有什么特殊要求没?
3) 胶切下来之后要怎么保存?可以保存多久?

还有米有其他需要注意的事项可以提醒一下……
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Permanent head Damage
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zhouyajun

新虫 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 应助指数-1, 请勿广告 2014-05-08 15:30:24
本帖内容被屏蔽

2楼2014-05-07 15:54:26
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sunrq516516: 金币+10, 有帮助 2014-05-10 19:19:34
配胶和切胶避免角蛋白污染,配胶试剂专用;
切胶样品-80℃保存,不同仪器可能要求不同;
如果考染能看到带就可以做质谱,银染出的带不一定够做质谱。
3楼2014-05-08 09:07:24
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lpzl

木虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 应助指数-1, 屏蔽内容, 请注意,你的回复不是应助。 2014-05-08 15:30:54
本帖内容被屏蔽

4楼2014-05-08 10:04:59
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-08 11:07:24
配胶和切胶避免角蛋白污染,配胶试剂专用;
切胶样品-80℃保存,不同仪器可能要求不同;
如果考染能看到带就可以做质谱,银染出的带不一定够做质谱。

恩谢谢。想再问一下放在-80保存的话……就是裸胶放进去= =?还是要在什么buffer里?用塑料袋封上……之类的?
Permanent head Damage
5楼2014-05-08 19:47:54
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

请问,“老板跟我说就是直接把WB的胶切下来送去做就可以了”   --切的 是 电泳胶,   还是 直接切的 WB显色的膜呢?  谢谢
12
6楼2014-05-11 15:31:47
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-05-11 17:31:47
请问,“老板跟我说就是直接把WB的胶切下来送去做就可以了”   --切的 是 电泳胶,   还是 直接切的 WB显色的膜呢?  谢谢

电泳胶,不要转膜。之后的处理应该是切胶,然后把胶融掉以提出蛋白= =??所以蛋白含量太少就白瞎了……

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

Permanent head Damage
7楼2014-05-12 14:12:09
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-05-12 14:12:09
电泳胶,不要转膜。之后的处理应该是切胶,然后把胶融掉以提出蛋白= =??所以蛋白含量太少就白瞎了……...

明白了,。谢谢你

[ 发自小木虫客户端 ]
12
8楼2014-05-12 14:15:31
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