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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 蛋白质质谱分析样品预处理
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质质谱分析样品预处理 已有3人参与

从来没做过这个，老板跟我说就是直接把WB的胶切下来送去做就可以了。想问一下有经验的朋友：

1） 要进行质谱检测，需要的上样量一般是多少？
2） 胶有什么特殊要求没？
3） 胶切下来之后要怎么保存？可以保存多久？

还有米有其他需要注意的事项可以提醒一下……
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Permanent head Damage
1楼 2014-05-07 13:52:29
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zhouyajun

新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 应助指数-1, 请勿广告 2014-05-08 15:30:24
本帖内容被屏蔽
2楼2014-05-07 15:54:26
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunrq516516: 金币+10, ★有帮助 2014-05-10 19:19:34
配胶和切胶避免角蛋白污染，配胶试剂专用；
切胶样品-80℃保存，不同仪器可能要求不同；
如果考染能看到带就可以做质谱，银染出的带不一定够做质谱。
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3楼2014-05-08 09:07:24
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lpzl

木虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 应助指数-1, 屏蔽内容, 请注意，你的回复不是应助。 2014-05-08 15:30:54
本帖内容被屏蔽
4楼2014-05-08 10:04:59
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sunrq516516

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-08 11:07:24
配胶和切胶避免角蛋白污染，配胶试剂专用；
切胶样品-80℃保存，不同仪器可能要求不同；
如果考染能看到带就可以做质谱，银染出的带不一定够做质谱。

恩谢谢。想再问一下放在-80保存的话……就是裸胶放进去= =？还是要在什么buffer里？用塑料袋封上……之类的？
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Permanent head Damage
5楼2014-05-08 19:47:54
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
请问，“老板跟我说就是直接把WB的胶切下来送去做就可以了”   --切的 是 电泳胶，   还是 直接切的 WB显色的膜呢？  谢谢
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12
6楼2014-05-11 15:31:47
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sunrq516516

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-05-11 17:31:47
请问，“老板跟我说就是直接把WB的胶切下来送去做就可以了”   --切的 是 电泳胶，   还是 直接切的 WB显色的膜呢？  谢谢

电泳胶，不要转膜。之后的处理应该是切胶，然后把胶融掉以提出蛋白= =？？所以蛋白含量太少就白瞎了……
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永峰1230
Permanent head Damage
7楼2014-05-12 14:12:09
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-05-12 14:12:09
电泳胶，不要转膜。之后的处理应该是切胶，然后把胶融掉以提出蛋白= =？？所以蛋白含量太少就白瞎了……...

明白了，。谢谢你

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12
8楼2014-05-12 14:15:31
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