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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相和液质中标品和样品溶剂不同出峰时间和面积的问题
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a皑雪c

银虫 (正式写手)

[求助] 液相和液质中标品和样品溶剂不同出峰时间和面积的问题

是测大鼠脑中神经递质的，我现在有20多种标品，有几个混标是用甲醇溶解的1mg/mL的，其他都是固体。看到一篇文献用的是waters的 Atlantis C18柱，流动相是乙腈和千分之一甲酸，他用的是乙腈-水溶液溶解的标品，做的标曲。
我看了许多文献，脑组织样品加含0.01%的EDTA-2Na的0.1mol/L的高氯酸匀浆，离心沉淀蛋白之后直接进样测定。标品有的是用水有的是用高氯酸溶解的，那么这几种样品和标品的出峰时间和面积应该会有不同吧。再者，高氯酸的pH应该很低吧，直接进样不会坏柱子吗？
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1楼 2014-11-18 12:57:01
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a皑雪c

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by archbishop at 2014-11-18 21:17:28
乙酰胆碱，多巴胺，5-HT。高氯酸是强酸，还有氧化性，最好不要加，甲酸可以试试。标品也和样品同样处理，匀浆完了要沉淀蛋白质，肯定是用有机溶剂，最后的溶剂不是水。...

非常感谢你的回复！
我还有好多疑问。正如你说，用水匀浆，然后再加有机溶剂沉淀蛋白质，离心之后水和有机溶剂不会分层吧，有机溶剂应该是甲醇或者乙腈？那这样样品最后的溶剂是水和有机溶剂的混合液？那标品用什么溶剂溶解呢？我的标品有的是用甲醇溶解的混标   
取样品匀浆时取一小部分，取的部位不同会不会结果差别很大，比如说取海马组织时只取其中一小部分
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9楼2014-11-18 21:54:41
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匿名

用户注销 (正式写手)
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2楼2014-11-18 13:00:54
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a皑雪c

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 植物资源 at 2014-11-18 13:00:54
我不知道呀，我没做过这方面的


感觉好多问题啊，液相一点都不懂
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3楼2014-11-18 13:11:37
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ashlink

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
a皑雪c: 金币+25, ★★★很有帮助 2014-11-18 20:55:49
C18柱偏酸性，而且进样量很少，和流动相一起经过柱子，酸性也低不了太多，对柱子影响不大。使用完，记得把柱子冲好就行。
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疯狂骑士带着他最心爱的黄衣小伙伴再次点亮天空，拯救了世界
4楼2014-11-18 13:32:50
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