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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA一直提不好，都想退学了，跪求各位帮助
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kakabada123

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA一直提不好，都想退学了，跪求各位帮助 已有2人参与

传统trizol法提取RNA连续一个月了 总是提不好 有的时候是浓度超级低 就跟没有一样  有的时候是电泳图拖尾严重 有的时候是浓度挺好的，OD260/280也好，但是电泳图没有任何东西。
于是买了OMEGA试剂盒
试剂盒一到 昨晚就熬夜提
左一条带是传统法，左二条带是试剂盒
没有跑marker
帮我看看，
第一，按哪个方法提取合格，还是都不合格？
第二，这样的结果能不能往下做，想做Q-PCR
谢谢了！

RNA一直提不好，都想退学了，跪求各位帮助
电泳图.JPG
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1楼 2014-11-07 19:42:01
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小花猫阿

新虫 (小有名气)
RNA提取，一定要格外小心翼翼啊。
实验前所有用的东西包括桌子全部酒精擦一遍，保证无污染，试剂能用新的就用新的，带上口罩，离别人远点，给自己一个独立干净的空间很重要，最好自己一个封闭干净的空间。
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15楼2014-11-11 12:59:25
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普通回帖

li245824369

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-07 21:47:43
你这提的是什么里的RNA啊？
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2楼2014-11-07 19:44:00
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fuchange918

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-07 21:47:50
第一道，我貌似只看到了一条带，和第二道的相比较的话，应该是5s带，所以第一道的提取方法肯定不可以。
第二道，可以看出18s是28s亮度的2倍多，应该是降解严重（特殊物种除外），做Q-PCR需慎重。
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3楼2014-11-07 20:31:54
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Neo2000

木虫 (著名写手)
连胶都没跑好，看来楼主有很多地方没做到位，留下QQ聊

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-11-07 22:34:38
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kakabada123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-07 22:34:38
连胶都没跑好，看来楼主有很多地方没做到位，留下QQ聊

好的 您留下 我加您~
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5楼2014-11-07 22:37:35
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kakabada123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fuchange918 at 2014-11-07 20:31:54
第一道，我貌似只看到了一条带，和第二道的相比较的话，应该是5s带，所以第一道的提取方法肯定不可以。
第二道，可以看出18s是28s亮度的2倍多，应该是降解严重（特殊物种除外），做Q-PCR需慎重。

第二道用的试剂盒 所以怀疑是不是匀浆时间有点长 用了大约3分钟 做普通PCR是可以的么
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6楼2014-11-07 22:38:41
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kakabada123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by li245824369 at 2014-11-07 19:44:00
你这提的是什么里的RNA啊？

腮腺 不知道内源性酶多不多
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7楼2014-11-07 22:42:22
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fuchange918

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by kakabada123 at 2014-11-07 22:38:41
第二道用的试剂盒 所以怀疑是不是匀浆时间有点长 用了大约3分钟 做普通PCR是可以的么...

普通PCR可以试一下
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8楼2014-11-08 08:45:33
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willychen34

木虫 (著名写手)
试剂盒啊~~~
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所谓兵来将挡，水来土掩，总有一天，会实现的。
9楼2014-11-09 19:23:05
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quiller2000

木虫 (著名写手)
你要看看是不是你的材料一开始就降解了，材料如何保存的要考虑一下。

要是近，可以来我们组提，我们专门做RNA降解的
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致良知
10楼2014-11-09 22:11:47
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