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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » 肝素钠抗凝时间检测
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牛氓横侽人

新虫 (初入文坛)

[求助] 肝素钠抗凝时间检测 已有1人参与

请教大神：我要检测肝素钠标准品的抗凝时间作为对照，但血液过了很久仍不凝结，求帮助！！！！  我先把效价为150U/mg的肝素钠标准品用水溶成1mg/mL的溶液，再取出0.1mL用生理盐水稀释到7.5mL，也就是每mL稀释液中含肝素钠2单位，最后取0.1mL的稀释液到小试管中，再加入0.9mL的新鲜兔血，置于37摄氏度的水浴锅中，记录抗凝其时间。可是为什么过了很多小时之后血液并没有凝结？？？是因为肝素钠浓度大吗？？不过0.1mL的稀释液中肝素钠的量已经很少了啊！
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1楼 2014-10-23 22:18:59
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liubin

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
牛氓横侽人: 金币+20 2014-10-24 10:29:01
1. 增加血液的量试试。
2.你判断凝血的标准是什么？有莫有在显微镜下看看
3.检查一下肝素试剂外包装上的标签，看看你在折算浓度时有莫有出错
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2楼2014-10-24 08:29:36
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牛氓横侽人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liubin at 2014-10-24 08:29:36
1. 增加血液的量试试。
2.你判断凝血的标准是什么？有莫有在显微镜下看看
3.检查一下肝素试剂外包装上的标签，看看你在折算浓度时有莫有出错

因为买的兔子很难抽血，所以血液的量就很不好增加；我是直接肉眼观察血液是否凝结的，看着是没凝，就在摇晃时还能很好流动；
买的肝素钠上面就是写着150U/mg的 应该没错啊
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3楼2014-10-24 09:27:49
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liubin

专家顾问 (著名写手)
如果数据要发文章的话。你要使用分光光度计的OD值作为判断凝血程度的标准。

分别需要以完全凝血和完全没有凝血的血液作为对照。
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4楼2014-10-24 11:49:07
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liubin

专家顾问 (著名写手)
你可以直接从兔子的颈静脉取血
或者从胸腔取血
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5楼2014-10-24 11:51:06
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7judy

新虫 (初入文坛)
额 楼主要用多少血呀 昨天刚从小兔子上抽了20ml血 应该不算少了吧 而且很好抽的呀
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6楼2014-10-25 16:09:15
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牛氓横侽人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 7judy at 2014-10-25 16:09:15
额 楼主要用多少血呀 昨天刚从小兔子上抽了20ml血 应该不算少了吧 而且很好抽的呀

其实一次用的也不多   就是抽不出来啊  连3mL都抽不到  我们从耳朵上抽的
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7楼2014-10-26 08:29:04
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vigarwong

铁虫 (小有名气)
第一.你的比例问题，0.9：0.1，这是标准的肝素抗凝管的中血液和抗凝剂的比例，所以放个几天基本上都不凝，很多个小时也不凝。
第二.测凝血一般都是上机测凝血酶原时间的，第一次见自己计时看凝血时间的。
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8楼2014-11-28 20:02:41
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