24小时热门版块排行榜    

查看: 1660  |  回复: 3

wccbb

木虫 (著名写手)

[求助] 内标法加入量的问题 谢谢 已有1人参与

各位大侠:
      做组织分布实验,采用内标法计算。空白预实验得到10ul(50ug/ml)【这个浓度差不多是标准曲线上面100%的点浓度】的药物与10ul(10ug/ml)内标经过样品处理后进样的峰面积 二者相接近。我想请教一下,我认为内标的加入量应该本着A药/A内=1,即药物和内标的响应值相接近,但是有的文献介绍是二者浓度相接近为原则,不知道哪个正确?还有 药物与内标的峰面积比值,有没有必须小于1的说法,还是大于1也可以?我预实验的绝对回收率大概是60%多,是否可以,我看论文中都写80%多,不知道怎么做的?最后一个问题:含有内标的方法中,绝对回收率和相对回收率怎么计算?非常感谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rosegarden

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wccbb: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-10-23 08:35:22
内标的浓度没有严格的要求。
做生物样品分析的时候,一般习惯内标峰面积控制在你标曲ULOQ化合物峰面积的50%左右,只要质谱的响应比较稳定即可。
样品前处理后,一般绝对回收率要求在80%以上,认为方法较好。
但是只要控制你低中高浓度的回收率CV不是很大,你的方法也是可行的。
绝对回收率是用峰面积比值来算,对照组没有提取过程,其他保持一致。
相对回收率是用ratio计算。
坚持
2楼2014-10-22 20:32:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wccbb

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by rosegarden at 2014-10-22 20:32:29
内标的浓度没有严格的要求。
做生物样品分析的时候,一般习惯内标峰面积控制在你标曲ULOQ化合物峰面积的50%左右,只要质谱的响应比较稳定即可。
样品前处理后,一般绝对回收率要求在80%以上,认为方法较好。
但是 ...

非常感谢,请问“相对回收率是用ratio计算”否都具体说一下,给举个简单的例子 谢谢啦
3楼2014-10-23 08:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rosegarden

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wccbb at 2014-10-23 08:36:52
非常感谢,请问“相对回收率是用ratio计算”否都具体说一下,给举个简单的例子 谢谢啦...

做生物样本分析的时候通常采用内标法。
在进行定量分析的时候,是采用ratio,也就是f值:化合物和内标的峰面积比值。
相对回收率的计算就是用样品组和对照组ratio的比值
坚持
4楼2014-10-23 16:09:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wccbb 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 6/300 2026-09-02 23:59 by rM1TE0WVDIIY
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 3/150 2026-09-02 22:50 by rM1TE0WVDIIY
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +14 Kittylucky 2026-08-27 15/750 2026-09-02 19:35 by liumei0601
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
信息提示
请填处理意见