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cc_yang

新虫 (小有名气)

[求助] 请教用黄嘌呤氧化酶-NBT法检测动物的SOD活性的具体方法,不要试剂盒,谢谢!!

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毕业你好

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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cc_yang: 金币+5, 有帮助 2013-09-11 20:36:59
可以试试WST法,NBT法的话相对来说已经不适合发论文了,而且主流的WST法价格也不高
2楼2013-09-11 16:36:25
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cc_yang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 毕业你好 at 2013-09-11 16:36:25
可以试试WST法,NBT法的话相对来说已经不适合发论文了,而且主流的WST法价格也不高

谢谢!我测得样比较多,打算自己配溶液,请问有没有具体的方法?谢谢!
3楼2013-09-11 21:24:40
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毕业你好

新虫 (小有名气)

一方面我对NBT法说实话了解的不够多,所以就不在这边多提NBT了
第二个方面,WST法相对于NBT法的话,不会跟黄嘌呤氧化酶反应,染料水溶性更好等优势,我把WST法的方法这边简单讲一下吧:
先测SOD抑制率:
1)将样品稀释7个梯度,每个样品孔和空白孔2中分别加入20 μl样品溶液,在空白孔1和空白孔3中分别加入20 μl ddH2O(相当于做3个空白对照)
2)每孔分别加入200 μl WST工作液,混匀
3)空白孔2和空白孔3中分别加入20 μl Dilution buffer
4)样品孔和空白孔1中分别加入20 μl酶工作液,充分混合
5)37℃培养箱中培养20分钟
6)用酶标仪450 nm处读数
7)有个公式计算SOD的抑制率%
SOD抑制率%(对WST-1的抑制率)=[(A空白1–A空白3)-(A样品–A空白2)]/(A空白1–A空白3)×100
(做出抑制率的话可以通过公式计算SOD活性,如果你需要的话可以留个邮箱我到时候发给你~)
相比起自己配溶液很麻烦,现在市面上的SOD试剂盒很便宜,进口的现在都比国产便宜,平均一个孔就4毛钱多一点。
如果你还是准备用NBT法做,可以在google中搜:NBT+样品的英文名,可能会有相关的文献,方便你做实验的前期准备~
希望能够帮到你!
4楼2013-09-12 08:51:10
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cc_yang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 毕业你好 at 2013-09-12 08:51:10
一方面我对NBT法说实话了解的不够多,所以就不在这边多提NBT了
第二个方面,WST法相对于NBT法的话,不会跟黄嘌呤氧化酶反应,染料水溶性更好等优势,我把WST法的方法这边简单讲一下吧:
先测SOD抑制率:
1)将样 ...

谢谢!!
5楼2013-09-13 09:44:43
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浩海涌涛

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 毕业你好 at 2013-09-12 08:51:10
一方面我对NBT法说实话了解的不够多,所以就不在这边多提NBT了
第二个方面,WST法相对于NBT法的话,不会跟黄嘌呤氧化酶反应,染料水溶性更好等优势,我把WST法的方法这边简单讲一下吧:
先测SOD抑制率:
1)将样 ...

你好,我现在正在做SOD活性检测,可以把SOD活性计算公式发我一份吗,不胜感激!
我愿如风,随心而动
6楼2013-12-09 10:40:08
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毕业你好

新虫 (小有名气)

内容已删除
7楼2013-12-09 16:31:54
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