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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教用黄嘌呤氧化酶-NBT法检测动物的SOD活性的具体方法，不要试剂盒，谢谢！！
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楼1970-01-01 08:00:00
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cc_yang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 毕业你好 at 2013-09-12 08:51:10
一方面我对NBT法说实话了解的不够多，所以就不在这边多提NBT了
第二个方面，WST法相对于NBT法的话，不会跟黄嘌呤氧化酶反应，染料水溶性更好等优势，我把WST法的方法这边简单讲一下吧：
先测SOD抑制率：
1）将样 ...

谢谢！！
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5楼2013-09-13 09:44:43
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毕业你好

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cc_yang: 金币+5, ★有帮助 2013-09-11 20:36:59
可以试试WST法，NBT法的话相对来说已经不适合发论文了，而且主流的WST法价格也不高
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2楼2013-09-11 16:36:25
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cc_yang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 毕业你好 at 2013-09-11 16:36:25
可以试试WST法，NBT法的话相对来说已经不适合发论文了，而且主流的WST法价格也不高

谢谢！我测得样比较多，打算自己配溶液，请问有没有具体的方法？谢谢！
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3楼2013-09-11 21:24:40
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毕业你好

新虫 (小有名气)
一方面我对NBT法说实话了解的不够多，所以就不在这边多提NBT了
第二个方面，WST法相对于NBT法的话，不会跟黄嘌呤氧化酶反应，染料水溶性更好等优势，我把WST法的方法这边简单讲一下吧：
先测SOD抑制率：
1）将样品稀释7个梯度，每个样品孔和空白孔2中分别加入20 μl样品溶液，在空白孔1和空白孔3中分别加入20 μl ddH2O（相当于做3个空白对照）
2）每孔分别加入200 μl WST工作液，混匀
3）空白孔2和空白孔3中分别加入20 μl Dilution buffer
4）样品孔和空白孔1中分别加入20 μl酶工作液，充分混合
5）37℃培养箱中培养20分钟
6）用酶标仪450 nm处读数
7）有个公式计算SOD的抑制率%
SOD抑制率%（对WST-1的抑制率）=[（A空白1–A空白3）-(A样品–A空白2）]/（A空白1–A空白3）×100
（做出抑制率的话可以通过公式计算SOD活性，如果你需要的话可以留个邮箱我到时候发给你~）
相比起自己配溶液很麻烦，现在市面上的SOD试剂盒很便宜，进口的现在都比国产便宜，平均一个孔就4毛钱多一点。
如果你还是准备用NBT法做，可以在google中搜：NBT+样品的英文名，可能会有相关的文献，方便你做实验的前期准备~
希望能够帮到你！
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4楼2013-09-12 08:51:10
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