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请教用黄嘌呤氧化酶-NBT法检测动物的SOD活性的具体方法,不要试剂盒,谢谢!!
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2楼2013-09-11 16:36:25
3楼2013-09-11 21:24:40
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一方面我对NBT法说实话了解的不够多,所以就不在这边多提NBT了 第二个方面,WST法相对于NBT法的话,不会跟黄嘌呤氧化酶反应,染料水溶性更好等优势,我把WST法的方法这边简单讲一下吧: 先测SOD抑制率: 1)将样品稀释7个梯度,每个样品孔和空白孔2中分别加入20 μl样品溶液,在空白孔1和空白孔3中分别加入20 μl ddH2O(相当于做3个空白对照) 2)每孔分别加入200 μl WST工作液,混匀 3)空白孔2和空白孔3中分别加入20 μl Dilution buffer 4)样品孔和空白孔1中分别加入20 μl酶工作液,充分混合 5)37℃培养箱中培养20分钟 6)用酶标仪450 nm处读数 7)有个公式计算SOD的抑制率% SOD抑制率%(对WST-1的抑制率)=[(A空白1–A空白3)-(A样品–A空白2)]/(A空白1–A空白3)×100 (做出抑制率的话可以通过公式计算SOD活性,如果你需要的话可以留个邮箱我到时候发给你~) 相比起自己配溶液很麻烦,现在市面上的SOD试剂盒很便宜,进口的现在都比国产便宜,平均一个孔就4毛钱多一点。 如果你还是准备用NBT法做,可以在google中搜:NBT+样品的英文名,可能会有相关的文献,方便你做实验的前期准备~ 希望能够帮到你! |
4楼2013-09-12 08:51:10
5楼2013-09-13 09:44:43
浩海涌涛
铜虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 145.7
- 散金: 10
- 帖子: 110
- 在线: 48.5小时
- 虫号: 1678957
- 注册: 2012-03-09
- 性别: GG
- 专业: 分离过程

6楼2013-12-09 10:40:08
7楼2013-12-09 16:31:54









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