| 查看: 2285 | 回复: 3 | |||
[求助]
菌液PCR中没加片段和用水作对照都有条带，怎么解释？？？ 已有1人参与
|
| 做连接时有对照没加片段和没加连接酶，涂板摇菌后菌液PCR都有条带，用水作模板也有条带，条带位置还是应有的位置，怎么解释？？？是什么东西污染了吗，怎么解决？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有185人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 菌液PCR产物电泳图，怎么解释？
已经有12人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-19 00:32:26
yan342221: 金币+5 2014-10-20 19:03:04
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-19 00:32:26
yan342221: 金币+5 2014-10-20 19:03:04
|
首先说没加连接酶，能想到的可能是楼主在载体的纯化中没割胶回收，导致没有被切割的载体一起混在最后的连接混合物中。所以如果不幸言中的话请楼主割胶回收酶处理过的载体。 然后是加水也能连上，当然上述没被切割的载体的污染也会导致这个问题，但更常见的原因是酶切过后的载体没经过去磷酸化（BAP或CIAP）处理，导致载体的自我连接（这种情况在单酶切下发生率很高！）。 |
2楼2014-10-18 22:43:43
3楼2014-10-20 19:02:49
4楼2014-10-20 23:24:19
