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chtao0924

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教一些共显性的标记问题已有1人参与

共显性是指能同时表达的一对等位基因,微卫星中扩增的不是都是基本与基因表达无关的重复序列吗,而PCR的模板链为双链DNA分子,其上面应该是只有一对等位基因的其中一个基因(比如A或者a),为什么泳道中会有两条带,并且可以判断其为杂合子,一条带的时候为纯合子?

因为初学,看了些pcr的原理,我是不是有什么概念上的东西搞错了?请大家不吝赐教,谢谢!
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南有乔木张恺

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by badman20 at 2014-10-18 08:55:10
SSR标记和真正的基因是有本质区别的,简单来说,SSR标记只是可以知道来自父本和母本的同源染色体上的对应位点的DNA序列(重复序列数目)是否相同,这段序列可能是有功能的,也可能是没有功能的。而真正的基因与性状 ...

也就是说,ssr标记,对于二倍体的话只能扩增出来1条带就是纯合,两条带就是杂合,但是我做的ssr为什么能扩增出4,5条带呢,2倍体。ssr是串联重复序列两端保守序列设计引物,但是一个基因组中会有很多个重复序列。因此会跑出很多个不一样的条带,这个和纯合杂合没有关系吧。我这样理解,不对的地方请指导。
7楼2016-01-22 19:53:28
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badman20

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
LZ需要恶补相关知识。首先,扩增出来的条带不一定是与基因表达无关的,如果扩增片段在基因的外显子里面(EST序列),就很可能与表达密切相关;第二,PCR模板为双链DNA分没错,但是理想状态下SSR扩增的条代并不是来自同一DNA分子(或者说同一条染色体),而是分别来自两条(二倍体)或多条(多倍体)不同的染色体(同源染色体,半数来自父本,半数来自母本)。如果来自父本的染色体上的DNA序列与来自母本的对应位点的序列相同,则扩增出来体现为一条带(即纯合子),反之如来自父本的DNA对应位点与母本的不同,则体现为两条带(即杂合子)。
2楼2014-10-17 22:29:45
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chtao0924

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by badman20 at 2014-10-17 22:29:45
LZ需要恶补相关知识。首先,扩增出来的条带不一定是与基因表达无关的,如果扩增片段在基因的外显子里面(EST序列),就很可能与表达密切相关;第二,PCR模板为双链DNA分没错,但是理想状态下SSR扩增的条代并不是来 ...

谢谢,那么这两条带分别代表的是不同的等位基因是吗,比如说A和B?
共显性标记只能看出杂合和纯合,而看不出显隐性是吗,比如A和a?
3楼2014-10-17 22:53:08
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chtao0924

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by badman20 at 2014-10-17 22:29:45
LZ需要恶补相关知识。首先,扩增出来的条带不一定是与基因表达无关的,如果扩增片段在基因的外显子里面(EST序列),就很可能与表达密切相关;第二,PCR模板为双链DNA分没错,但是理想状态下SSR扩增的条代并不是来 ...

还有,微卫星扩增的简单串联重复序列,是因为存在不同的等位基因才导致重复序列片段大小不同而呈现不同的条带的吗?
一个位点可能会有多个等位基因,为什么一般只有两个等位基因条带,会不会有3个或更多等位基因而出多个杂合条带的情况?
4楼2014-10-17 23:03:11
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