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XcmI酶切后不见小片段 已有1人参与
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自己构建了一个载体，在载体的LacZ两端引入了XcmI酶的酶切位点，经过测序证实过了。 最近重新抽过质粒，拿XcmI酶来切的时候，切完之后跑电泳，却看不到切下来的lacZ片段，只有剩下的大片段，纯化之后做连接，转化后也是没有菌落。 之前有一次，是可以看到LacZ的片段的，大概在600多bp的位置。而且成功重组了目的基因进去。 用的NEB的XcmI酶，37度45分钟，65度灭活20分钟。 |
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2楼2014-10-17 10:35:04