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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 制备型反相色谱C18 ODS柱 流动相问题
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strawberrya

金虫 (正式写手)

[交流] 制备型反相色谱C18 ODS柱 流动相问题 已有1人参与

流动相有的文献用：0.1%甲酸水溶液，有的文献用0.1%。三氟乙酸水溶液，他们有什么区别，好像文献中用0.1% 三氟乙酸水溶液比较常用
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1楼 2014-10-13 15:36:53
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cpuclz

木虫 (正式写手)
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strawberrya: 金币+2 2014-10-14 10:24:53
strawberrya: 金币+3 2014-11-29 16:37:56
TFA的峰型比较好。
有些项目要求不能有三氟乙酸盐什么的，所以才用甲酸做。
如果没有特殊要求，一般都用三氟乙酸。
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2楼2014-10-13 15:50:26
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longyi706565

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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strawberrya: 金币+3 2014-10-14 10:24:42
strawberrya: 金币+2 2014-11-29 16:38:15
都试试吧。相对来说TFA比较伤柱子。
对一般化合物来说，都没有区别，主要作用都是控制pH用的。
另：我也发现国外很多文献都喜欢用TFA，不过如果只是文献而非标准类的话，一般都不靠谱，都需要自己从新开发方法，文献方法只能是参考。
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3楼2014-10-13 15:56:34
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swallow13

禁虫 (正式写手)
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strawberrya: 金币+3 2014-10-14 10:24:37
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4楼2014-10-13 16:19:23
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swallow13

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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6楼2014-10-14 10:26:45
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普通回帖

strawberrya

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by swallow13 at 2014-10-13 16:19:23
我觉得没有所谓的伤柱子一说 我是做多肽的 一直用的是0.1% TFA，C18制备柱用了四五年了都还没啥大问题 TFA改善峰型的效果会比较好一些 但TFA可能存在于样品中 如果想直接拿样品进行质谱分析 可能就没办法用 另外 终 ...

三氟乙酸可以用低压旋转蒸发除去吧，它的沸点就75左右，可以不断加水除去吧？
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5楼2014-10-14 10:24:14
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strawberrya

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by swallow13 at 2014-10-14 10:26:45
我们纯化完的多肽先旋蒸 然后冻干 产物里还是有很多三氟乙酸 应该是会以氢键或离子键连接 导致蒸不掉 所以一般要加一步离子交换...

离子交换的话，多肽不是也被吸附了？多肽的得率有算过吗？
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7楼2014-10-14 10:30:08
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strawberrya

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by swallow13 at 2014-10-14 10:26:45
我们纯化完的多肽先旋蒸 然后冻干 产物里还是有很多三氟乙酸 应该是会以氢键或离子键连接 导致蒸不掉 所以一般要加一步离子交换...

制备型的多肽,你们流动相是用什么？乙腈和TFA，然后再用离子交换除去TFA?还是用其他易除去的流动相？
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8楼2014-10-14 10:36:58
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swallow13

禁虫 (正式写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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9楼2014-10-14 10:50:24
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swallow13

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
strawberrya: 金币+5, 谢谢 2014-10-14 12:03:12
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10楼2014-10-14 10:51:02
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