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orzgirl

新虫 (小有名气)

[交流] 为什么通常多肽合成公司只提供多肽的HPLC和质谱数据? 已有1人参与

如题.  为什么不提供核磁数据,就能确定氨基酸序列的正确吗

前后委托不同公司合成了一个20 aa 的 多肽,都只提供HPLC 和 质谱, 从质谱上看分子量都是对的   但是两个多肽的 核磁氢谱却有不同,不知道是什么原因?
请教各位大侠,是不是某个公司合成的多肽有问题,还是说从氢谱上不能直接对比?谢谢

[ Last edited by 红舟流星 on 2014-10-15 at 06:56 ]
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阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)

帮顶一下,不懂 ~~~~~~~~~~~~~
自强不息,厚德载物;独立精神,自由思想。
2楼2014-10-13 06:31:28
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合成多肽

铁虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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orzgirl: 金币+5, 谢谢。 差异只在3.5-4.0 ppm 的地方, 但是出峰差异蛮大的,多了几组峰,你提到的盐分常见的有什么呢 谢谢 2014-10-13 20:55:30
orzgirl(红舟流星代发): 金币+2, 代扣代发金币 2015-02-28 21:25:10
是的,现在多肽合成公司都是只提供HPLC和质谱报告的,这是现在合成多肽行业中的标准报告,核磁这一块基本很难保证。现在合成多肽技术主要是化学合成,会用到一些有机溶剂,合成期间肯定会会有一些盐分生成,而且每一批次的盐分生成量是比较难控制成一样的的,而多肽中的盐分是影响多肽氢谱结果的一个非常重要的因素,两次合成的多肽氢谱结果出现差异是有可能的。

      至于结构,多肽化学合成,都是从C端到N端一个一个接的,序列一般都是能保证正确的,所以纯度,质谱是保证定制多肽行业中最重要的检测标准的。

       个人建议,希望对你有所帮助。
只有明天,没有如果 QQ:2692015625 欢迎交流
3楼2014-10-13 09:43:05
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好朋友的祝福

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
orzgirl: 金币+1, 测序是不是挺麻烦的 谢谢 2014-10-13 20:56:07
orzgirl(红舟流星代发): 金币+1, 代扣代发金币 2015-02-28 21:25:21
99%多肽一般MS对了,他这个产品也对了!因为合成过程是根据肯定序列一个一个接的!当然!这个是纯信用的!只会有极其个别的会出现多肽造假!如果要知道序列,那就测序!
4楼2014-10-13 11:55:50
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nagasaki

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你序列是否含有特殊的氨基酸,比如D型氨基酸,D型相比L型贵。
希望和同行有更多的交流机会!
5楼2014-10-13 16:28:47
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orzgirl

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by nagasaki at 2014-10-13 16:28:47
你序列是否含有特殊的氨基酸,比如D型氨基酸,D型相比L型贵。

其中有一个 D型 氨基酸,  但是怎么检测这个氨基酸是D型还是L型呢
6楼2014-10-13 20:58:27
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
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orzgirl: 金币+1 2014-10-14 00:02:56
楼主,质谱相同不能说明问题,比如Ile 和Leu的分子量是一样,你根本分不清谁是谁。
20肽用氢谱去表征,要解析起来难度不小啊,C13NMR应该更好一些吧!还有个直接的方法就是把两个样品1:1混合后走HPLC,看看是不是可以重合。如果完全能重合,基本就可以定下来。
当然楼上说的序列分析绝对是好方法,但是似乎没有必要花大价钱去做。
7楼2014-10-13 22:48:32
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orzgirl

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by shale1983 at 2014-10-13 22:48:32
楼主,质谱相同不能说明问题,比如Ile 和Leu的分子量是一样,你根本分不清谁是谁。
20肽用氢谱去表征,要解析起来难度不小啊,C13NMR应该更好一些吧!还有个直接的方法就是把两个样品1:1混合后走HPLC,看看是不是 ...

没有这两个氨基酸。
碳更难把,浓度要求大,溶解度有限制。
HPLC 这个办法好像不错。 那你也觉得核磁不同也可能是同一条多肽?
8楼2014-10-14 00:02:52
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by orzgirl at 2014-10-14 00:02:52
没有这两个氨基酸。
碳更难把,浓度要求大,溶解度有限制。
HPLC 这个办法好像不错。 那你也觉得核磁不同也可能是同一条多肽?...

个人认为碳谱会更好一些,就是要用的多肽量会要多好几倍,楼主可能会心疼。
我们没有看到你的氢谱,也不知道两个东西打出来的核磁是不是完全不一样,还是混样进一针实惠方便。
9楼2014-10-14 13:31:00
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orzgirl

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by shale1983 at 2014-10-14 13:31:00
个人认为碳谱会更好一些,就是要用的多肽量会要多好几倍,楼主可能会心疼。
我们没有看到你的氢谱,也不知道两个东西打出来的核磁是不是完全不一样,还是混样进一针实惠方便。...

两个氢谱其实差异只在3.5-4.0 ppm处, 有一个多了两组峰,并且强度挺大
10楼2014-10-14 19:50:46
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