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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » DNA复制过程的相关问题
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justsmiling

银虫 (小有名气)

[求助] DNA复制过程的相关问题 已有2人参与

请问在DNA复制过程中除了模板，引物，dNTP,Mg2+外，还需要加ATP提供能量吗？在复制过程中加样的顺序有没有要求呢，我用的是Klenow Fragment聚合酶。
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1楼 2014-10-12 21:29:56
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-13 09:06:03
不需要ATP，一般来说，最后加酶
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低调务实！
2楼2014-10-13 08:48:16
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DNA复制（实质上是脱氧核苷酸的聚合反应）所需要的能量就是由dNTP混合物提供的，它同时充当了聚合单体和能量来源两个角色。

DNA复制中，每引入一个脱氧核苷酸，就有一个dNTP（脱氧三磷酸核苷酸）分子作为反应物进入，然后发生水解，水解释放的能量驱使dNMP（脱氧单磷酸核苷酸）部分作为DNA链的环节与已有链连接，同时产生一个焦磷酸分子脱离聚合体系。
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3楼2014-10-13 11:25:31
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by greeneese at 2014-10-13 11:25:31
DNA复制（实质上是脱氧核苷酸的聚合反应）所需要的能量就是由dNTP混合物提供的，它同时充当了聚合单体和能量来源两个角色。

DNA复制中，每引入一个脱氧核苷酸，就有一个dNTP（脱氧三磷酸核苷酸）分子作为反应物进 ...

第二段表述不太准确可能会造成误解，应该是 “每当需要引入一个脱氧核苷酸的时候，就会有一个dNTP分子作为反应物进入”。
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4楼2014-10-13 11:27:19
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justsmiling

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 更深的蓝 at 2014-10-13 08:48:16
不需要ATP，一般来说，最后加酶

请问模板，引物，还有dNTP的加入顺序有要求吗？比如要先让模板和引物反应一段时间再加入dNTP之类的？
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5楼2014-10-13 13:25:18
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by justsmiling at 2014-10-13 13:25:18
请问模板，引物，还有dNTP的加入顺序有要求吗？比如要先让模板和引物反应一段时间再加入dNTP之类的？...

理论上模板与引物先结合一会，对扩增有利，你自己可以研究一下有没有影响
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低调务实！
6楼2014-10-13 14:49:38
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